Rol del coactivador de receptores nucleares RAC3 en la regulación de la apoptosis

COLÓ GEORGINA P; RUBIO M. FERNANDA; ALVARADO CECILIA V; NOJEK I; ECHEVERRIA P; GALIGNIANA P; NAHMOD V E; COSTAS M A

Mar del Plata-Buenos Aires

Congreso; Reunion Anual de la Sociedad Argentina de Investigacion Clinica; 2006

424. (297) ROL DEL COACTIVADOR DE RECEPTORES NUCLEARES RAC3 EN LA REGULACIÓN DE LA APOPTOSIS. (1) COLO GEORGINA PAMELA, (1) RUBIO MARÍA FERNANDA, (1) ALVARADO CECILIA VIVIANA, (1) NOJEK IGNACIO MARTíN,(1) ECHEVERRÍA PABLO CHRISTIAN,(2) MARIO D. GALIGNANA,(1) NAHMOD VICTOR ELÍAS, (1) COSTAS MONICA ALEJANDRA (1) Instituto de Investigaciones Médicas A. Lanari, (2) Fundación Instituto Leloir Los coactivadores de receptores nucleares de la flia p160 se encuentran normalmente en cantidades limitantes en células normales, pero sobeexpresados en ciertos tumores. Demostramos previamente que RAC3 es además un coactivador del factor de transcripción anti-apoptótico NF-•B, y su sobreexpresión disminuye la sensibilidad a apoptosis. En este trabajo, estudiamos los efectos de la sobreexpresión y/o disminución de RAC3 en líneas celulares no tumorales HEK293 y leucémicas K562 ( naturalmente resistentes a TRAIL) bajo estímulos que inducen apoptosis vía mitocondrial (H2O2 1-2 mM) y de membrana (TRAIL 25ng/ml) respectivamente. Observamos que HEK293 presenta niveles indetectables y K562 tiene niveles altos del coactivador (Western blot). Aunque la sobreexpresión por transfección de RAC3 en HEK293 disminuyó en un 80 ± 3% la sensibilidad a apoptosis (Kit Biocolor), su disminución mediante siRNA en clones estables de K562 la aumentó en un 60±2%. No se detectaron diferencias significativas en los niveles de expresión de genes anti- y proapoptoticos de la flia.BcL-2 (Western blot) en ambas líneas ante altos o bajos niveles de RAC3, aunque su sobreexpresión por transfección en HEK293 disminuyó la activación de Caspasas-9 y 3 en un 41% y 54% respectivamente y la disminución de coactivador por siRNA en K562 aumentó la activación de Caspasas-8, 9 y 3 en 63%, 32% y 15% (Western blot) sensibilizándolas al estímulo de TRAIL. MAPK y AKT participan en cascadas de señales que controlan la proliferación y apoptosis celular. Observamos un aumento en la actividad de AKT y p38 (125% y 37% respecto de no transfectadas) y una disminución del 44% de ERK en células HEK293 que sobreexpresan RAC3 (Western blot). RAC3 contribuye al desarrollo tumoral, incluyendo células leucémicas, protegiendo de apoptosis inducida por distintas rutas y podría constituir un posible blanco de ataque para el tratamiento de tumores.