Alteraciones de la trombopoyesis en PTI: morfología y efecto de los autoanticuerpos y la matriz extracelular

GRODZIELSKI M; LEV RP; GOETTE NORA P; ESPASANDIN YR; HELLER PG; MOLINAS FC; MARTA R.F

Buenos Aires

Congreso; X Congreso Argentino de Hemostasia y Trombosis; 2012

Grupo CAHT

ALTERACIONES DE LA TROMBOPOYESIS EN PTI: MORFOLOGÍA Y EFECTO DE LOS AUTOANTICUERPOS Y LA MATRIZ EXTRACELULAR. Grodzielski M, Lev P, Goette N, Espasandin Y, Heller P, Molinas F, Marta R. Hematología Investigación, IDIM-CONICET, Instituto Lanari, UBA, C.A.B.A, Argentina La trombocitopenia inmune (PTI) involucra un desbalance inmunológico con producción de autoanticuerpos (autoAc) contra glicoproteínas plaquetarias, provocando su eliminación y afectando la megacariocitopoyesis. En la trombopoyesis normal el megacariocito maduro (MK) en contacto con el endotelio medular emite prolongaciones citoplasmáticas (proplaquetas: PP) que se ramifican, atraviesan la barrera endotelial y liberan plaquetas de sus extremos (tips) a la circulación. En este trabajo se evaluaron las características de las PP de MK normales en presencia de plasma de pacientes con PTI para detectar posibles anormalidades en la trombopoyesis en esta entidad. Se obtuvieron MK normales por cultivo de progenitores hematopoyéticos de sangre de cordón umbilical. El día 13 de cultivo se adicionó 10% de plasma de pacientes con PTI o controles a las células cultivadas sobre fibrinógeno o colágeno tipo I. Luego de 72hs, se fijaron e inmunomarcaron con CD61-FITC/Hoechst y se evaluó el porcentaje y la morfología de las PP por microscopía de epi-iluminación y utilizando un software de análisis celular. Se observó mayor %PP atípicas en MK cultivados sobre fibrinógeno en presencia de plasmas de PTI (n=7) respecto de controles (n=7, p=0.0016). Esta diferencia se refleja en un aumento del ancho de las PP (p=0.0143) y un menor número de tips (p=0.0162), no existiendo una asociación con la presencia de un determinado tipo de autoAc. La menor cantidad de tips sugiere que cada MK produciría menos plaquetas, mientras que el aumento del grosor podría interferir con el proceso normal por el cual las PP atraviesan la barrera endotelial para liberar las plaquetas. Para evaluar si la presencia de autoAc contra la GPIaIIa (receptor de colágeno) desbloquea la inhibición normal del colágeno en la formación de PP, en un estudio preliminar se comparó el %PP en MK normales cultivados sobre colágeno tipo I en presencia de plasmas de PTI conteniendo dichos autoAc, con los producidos sobre fibrinógeno. Estos plasmas no inhibieron la formación de PP en colágeno respecto a la de fibrinógeno, mientras que sí lo hicieron el plasma de un paciente conteniendo anti-GPIIbIIIa y un control, en un 57 y 65% respectivamente. Esto sugiere que los pacientes con anti-GPIaIIa generarían plaquetas prematuramente en una zona medular alejada del endotelio, impidiendo que las plaquetas sean liberadas a la circulación. En conclusión, las particularidades morfológicas encontradas y el comportamiento anormal de plasmas de pacientes con anti-GPIaIIa frente al colágeno, podrían ser nuevos factores contribuyentes a la trombocitopenia en PTI.