La sobre-expresión de la ciclofilina de 21 kDa del Trypanosoma cruzi sugiere su rol protagónico en la apertura del poro de permeabilidad mitocondrial

PATRICIA L BUSTOS,1 CÁMARA MARÍA DE LOS MILAGROS,2 ALINA E PERRONE,1 JACQUELINE BUA1,3

buenos aires

Jornada; XXV Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Protozoología y Enfermedades Parasitarias,; 2012

Sociedad Argentina de Protozologia

Las Ciclofilinas (CyPs) son enzimas involucradas en el plegamiento proteico y blanco de la droga inmunosupresora Ciclosporina A (CsA). La CyPD en mamíferos es una ciclofilina mitocondrial, involucrada en la apertura del poro de permeabilidad mitocondrial (mPTP). En nuestro laboratorio, hemos descripto la familia de genes de las ciclofilinas en el Trypanosoma cruzi, entre ellas, una ciclofilina mitocondrial de21kDa, TcCyP21 (homóloga a la CyPD), que se expresa en el parásito. En estudios anteriores, observamos que eventos como la degradación del ADN, la translocación del citocromo c o el clivaje de una proteína de tipo PARP, ocurren en T. cruzi en condiciones de stress oxidativo y son inhibidos en presencia de CsA. Con el objetivo de esclarecer el rol específico de la TcCyP21 se transfectaron epimastigotes de la cepa Y con la construcción pTEX- TcCyP21- eGFP (con y sin el péptido señal que predice la localización mitocondrial). Se observó que los parásitos que sobre-expresan la TcCyP21 no presentan diferencias significativas en la morfología ni en el crecimiento respecto de los parásitos de tipo salvaje. Por el contrario, los parásitos que sobre-expresan la construcción sin el péptido señal se vieron afectados en su crecimiento. Además, para estudiar el efecto de la sobre-expresión de la TcCyP21 en condiciones de stress oxidativo, se realizaron inducciones con H2O2 (1mM-5mM) o β-lapachona (1,25μM ? 5μM). Se observó que los epimastigotes Y de tipo salvaje, tratados con H2O2 y β-lapachona, presentaron una pérdida del potencial de la membrana mitocondrial en un 37,5% y 26%, respectivamente. Los epimastigotes que sobre-expresan la TcCyP21 no presentaron esta despolarización. Estos resultados indican que la TcCyP21 del parásito sería responsable de la integridad de la función mitocondrial ante estímulos de stress oxidativo. Este trabajo contó con la financiación del ANLIS, Malbrán, Fogarty D43TW007888, PIP 0317/10, Focanlis 2009 y el CAECIHS, UAI.