Participación de la TRH en la cardiotoxcicidad inducida por doxorrubicina (D).

PERES DIAZ, LS; LANDA, MS; TOBLLI, J; GONZALES MANSILLA, NL; PIROLA, CJ; GARCIA SI

Mar del Plata

Congreso; LVII Reunion Cientifica Anual Sociedad de Investigación Clínica; 2012

SAIC

El sistema de TRH está hiperactivado en el ventrículo izquierdo (VI) hipertrofiado de SHR. Su bloqueo previene la hipertrofia (HVI) a pesar de la hipertensión. En la HVI participan diferentes procesos como la fibrosis y la apoptosis. Como demostramos que la TRH es inducida por D en células cardiacas, estudiamos la participación de la TRH en la cardiotoxcicidad inducida por D en ratones C57 inhibiendo la TRH mediante siRNA intracardiaco previo al estimulo con D. Se dividieron 75 ratones macho C57 en 6 grupos de n=10. Al día 1 se les inyecto en corazón bajo anestesia 50uL de siRNA-TRH o siRNA-Con (5ug/ul) a 4 de los grupos. En el día 2, todos los grupos fueron inyectados ip. con D (200 ul,10 mg/kg ip. o solución salina, SF). Así se obtuvieron 6 grupos de animales: D; SF; D+siRNA-TRH; D+siRNA-Con, SF+si-TRH y SF+siRNA-Con. Los animales se sacrificaron a los 2, 4 y 7 días post inyección de D. El peso corporal presento una tendencia a ser menor en los grupos con D que no llego a ser significativa. En el VI cuantificamos la expresión génica (PCR tiempo real) del precursor de TRH (pTRH) y de diferentes marcadores de daño BNP y BMHC (hipertrofia), colágeno III (fibrosis), Bax/Bcl2 y caspasa 3 (apoptosis). Observamos un aumento (ANOVA y Tukey t) de la expresión del pTRH en los grupos con D a los 2 y 4 días que fue más marcado a los 7 días (2d: 145%, 4d:190% y 7d: 250%) confirmado por inmunohistoquímica. Este aumento no se observó en el grupo D+siRNA-TRH demostrando la eficiencia del bloqueo siRNA-TRH. El bloqueo de TRH a los 7 días de D atenuó (respecto a SF, p< 0.05), el aumento del índice Bax/Bcl2 y la expresión de caspasa 3 (Bax/Bcl2 D+siRNA-TRH: 120% vs D+siRNA-Con: 214%; Caspasa 3 D+siRNA-TRH: 95% vs D+siRNA-Con: 193%). El mismo efecto del siRNA-TRH se observó en la expresión de bMHC (bMHC D+siRNA-TRH: 111% vs D+siRNA-Con: 305%. Nuestros resultados demuestran la participación de la TRH cardiaca en la cardiotoxicidad inducida por doxorrubicina.