Síntesis de nuevas moléculas antiparasitarias

MARYLIN POURCELOT; MALENA LANDONI; ERIC GRAND; ALICIA S. COUTO; VILMA G. DUSCHAK; JOSÉ KOVENSKY

Mendoza -Argentina

Congreso; XVII Simposio Nacional de química Orgánica; 2009

Soc. Argentina de Investigación en Química Orgánica

SINTESIS DE NUEVAS MOLECULAS ANTIPARASITARIAS Marilyne Pourcelot1, Malena Landoni2, Eric Grand1, Alicia S. Couto2, Vilma G. Duschak3, José Kovensky11, Malena Landoni2, Eric Grand1, Alicia S. Couto2, Vilma G. Duschak3, José Kovensky12, Vilma G. Duschak3, José Kovensky1 1. Laboratoire des Glucides UMR 6219, Université de Picardie Jules Verne, 80039 Amiens, Francia 2. CIHIDECAR (CONICET) Departamento de Química Orgánica, Facultad de Ciencias Exactas y Naturales, Universidad de Buenos Aires, 1428 Buenos Aires, Argentina 3. Instituto Nacional de Parasitología, ANLIS-Malbrán, Ministerio de Salud, Buenos Aires, Argentina marilyne.pourcelot@u-picardie.fr La enfermedad de Chagas es una infección parasitaria que afecta a 90 millones de personas en el continente americano, y sigue siendo de difícil detección dado que su fase crónica aparece luego de 10 a 20 años de infección silenciosa. En el suero de pacientes, se encuentran anticuerpos dirigidos contra una glicoproteína del parásito T. cruzi llamada cruzipaína (Cz). Couto et al.1 han demostrado la presencia de sulfatos en las cadenas N-glicosídicas de Cz, indispensables para el reconocimiento antigénico, pero subsisten indeterminaciones sobre el número y de la posición de los grupo sulfato. Se sintetizaron conjugados de azúcares sulfatados y una proteína carrier (BSA), usando dos estrategias: a) el azúcar se trató con carbamato de amonio para dar una glicosilamina que se acopló directamente a la BSA; b) se introdujo un linker espaciador de 3 carbonos y un grupo azida, precursor de la amina que permite la unión a la BSA. El número de unidades de azúcar acopladas se determinó por MALDI-MS del conjugado.T. cruzi llamada cruzipaína (Cz). Couto et al.1 han demostrado la presencia de sulfatos en las cadenas N-glicosídicas de Cz, indispensables para el reconocimiento antigénico, pero subsisten indeterminaciones sobre el número y de la posición de los grupo sulfato. Se sintetizaron conjugados de azúcares sulfatados y una proteína carrier (BSA), usando dos estrategias: a) el azúcar se trató con carbamato de amonio para dar una glicosilamina que se acopló directamente a la BSA; b) se introdujo un linker espaciador de 3 carbonos y un grupo azida, precursor de la amina que permite la unión a la BSA. El número de unidades de azúcar acopladas se determinó por MALDI-MS del conjugado.llamada cruzipaína (Cz). Couto et al.1 han demostrado la presencia de sulfatos en las cadenas N-glicosídicas de Cz, indispensables para el reconocimiento antigénico, pero subsisten indeterminaciones sobre el número y de la posición de los grupo sulfato. Se sintetizaron conjugados de azúcares sulfatados y una proteína carrier (BSA), usando dos estrategias: a) el azúcar se trató con carbamato de amonio para dar una glicosilamina que se acopló directamente a la BSA; b) se introdujo un linker espaciador de 3 carbonos y un grupo azida, precursor de la amina que permite la unión a la BSA. El número de unidades de azúcar acopladas se determinó por MALDI-MS del conjugado.N-glicosídicas de Cz, indispensables para el reconocimiento antigénico, pero subsisten indeterminaciones sobre el número y de la posición de los grupo sulfato. Se sintetizaron conjugados de azúcares sulfatados y una proteína carrier (BSA), usando dos estrategias: a) el azúcar se trató con carbamato de amonio para dar una glicosilamina que se acopló directamente a la BSA; b) se introdujo un linker espaciador de 3 carbonos y un grupo azida, precursor de la amina que permite la unión a la BSA. El número de unidades de azúcar acopladas se determinó por MALDI-MS del conjugado. O HO OH NHSO3 -3 - HO OH NH4.COONH24.COONH2 MeOH O HO OH NHSO3 -3 - HO NH22 BSA, glutaraldehido buf fer fosfato pH 7,4 N N BSA O HO OH NHSO3 -3 - HO O HO OH NHAc -O3SO O N N BSA O HO OH NHAc HO OH O AcO OAc AcO N O CH2Cl2O3SO O N N BSA O HO OH NHAc HO OH O AcO OAc AcO N O CH2Cl22Cl2 HO(CH2)3N3, CuCl22)3N3, CuCl2 O AcO OAc NHAc AcO O N33 O HO OH NHAc -O3SO O NH2O3SO O NH22 a) b) i. SO3.Py, DMF ii. H2/Pd-C i. Ac2O, Py ii. TMSOTf BSA, glutaraldehido buffer fosfato pH 7,4i. SO3.Py, DMF ii. H2/Pd-C i. Ac2O, Py ii. TMSOTf BSA, glutaraldehido buffer fosfato pH 7,42/Pd-C i. Ac2O, Py ii. TMSOTf BSA, glutaraldehido buffer fosfato pH 7,42O, Py ii. TMSOTf BSA, glutaraldehido buffer fosfato pH 7,4 Por inmunización de ratones con la proteína nativa, se obtuvo un suero anti-Cz que reconoce moléculas sulfatadas, mientras que las mismas estructuras no sulfatadas no son reconocidas. Los resultados preliminares indican una respuesta creciente en función del contenido en sulfato. Estos estudios muestran la importancia de los grupos sulfato en la inmunoreactividad de la glicoproteína de T. cruzi, permitiría el desarrollo de un método de detección de la enfermedad de Chagas.T. cruzi, permitiría el desarrollo de un método de detección de la enfermedad de Chagas. 1. M. Barboza, V. G. Duschak, Y. Fukuyama, H. Nonami, R. Erra-Balsells, J. J. Cazzulo, A. S. Couto. Febs J., 2005, 3803-3815. Se agradece el financiamiento de ECOS-Sud (A06S01) Argentina-Francia para el intercambio de investigadores y doctorandos.Febs J., 2005, 3803-3815. Se agradece el financiamiento de ECOS-Sud (A06S01) Argentina-Francia para el intercambio de investigadores y doctorandos., 2005, 3803-3815. Se agradece el financiamiento de ECOS-Sud (A06S01) Argentina-Francia para el intercambio de investigadores y doctorandos.Sud (A06S01) Argentina-Francia para el intercambio de investigadores y doctorandos.