?Imágenes de fluorescencia para el monitoreo en línea de sistemas en flujo. Generación y análisis de datos multilineales

GOICOECHEA H C

Santa Rosa, La Pampa

Congreso; X Congreso Argentino de Química Analítica; 2019

Entre las técnicas analíticas tradicionales, la espectroscopia de fluorescencia es quizás la másversátil y sensible para el análisis de una gran variedad de muestras. Las técnicas de fluorescenciaen estado estacionario no convencionales, entre ellas, la espectroscopia de excitación-emisión defluorescencia, se han convertido en poderosas herramientas de análisis para sistemas de múltiplesfluoróforos, para experimentos estáticos en cubetas o en configuración en flujo, por ejemplo,acoplados a análisis de inyección en flujo (FIA) o cromatografía de líquidos (LC). En fluorescenciamolecular, los espectros de excitación y emisión son particularmente anchos, lo que resulta uninconveniente para los análisis de muestras complejas, siendo la calibración multivariada unaexcelente alternativa para extraer la información más relevante del sistema, en términoscuantitativos o cualitativos. Para sistemas en flujo o cinéticos, un objetivo muy difícil de lograr es laindependencia entre modos instrumentales, debido a que las señales cambian en el tiempo. Si bienla instrumentación moderna permite la adquisición de datos de orden superior, el principalinconveniente se basa en la velocidad de registro de los detectores, que generalmente es menor ala variación de la medida observable. La solución más obvia a este problema es realizar lasmediciones de una manera más rápida, incrementando la velocidad de adquisición de las señalesanalíticas. En este trabajo se presenta un espectrógrafo simple, económico y de rápido registro parala adquisición de matrices de excitación-emisión (EEM) de fluorescencia en sistemas en flujoacoplado a resolución quimiométrica de datos.El espectrógrafo desarrollado se utilizó en la adquisición de datos multidimensionales y los datosgenerados se evaluaron de manera cuantitativa y cualitativa en términos de capacidad predictivade un modelo de calibración de segundo orden y trilinealidad de los datos generados. Este últimoparámetro se evaluó para un arreglo de datos de 3-vias construidos con varias EEM registradaspara diferentes muestras (modelo de calibración de segundo orden) y para un dato de tercer ordenobtenido por adquisición de EEM a cada tiempo de elución de una corrida cromatográfica. Ambosmodelos fueron construidos para mezclas de analitos fluorescentes.Los resultados demostraron que el espectrógrafo desarrollado permite la adquisición de EEM losuficientemente rápida que permite lograr la obtención de datos perfectamente trilineales tanto paraanálisis cuantitativo mediante calibración multivariada de segundo orden, como también, en elmonitoreo de sistemas en flujo, superando satisfactoriamente el inconveniente de dependenciatiempo-detección. Esta contribución representa una valiosa y poderosa herramienta para laobtención de datos de orden superior sin pérdida de multi-linealidad, significando un gran paso parala quimiometría, la química analítica y otras áreas de investigación esencialmente, en el campo dela fisicoquímica y la biología