CONICET | Buscador de Institutos y Recursos Humanos

Las raíces de las plantas vasculares hospedan una gran variedad de hongos, entre ellos, se encuentra un grupo heterogéneo los endófitos septados oscuros, cuyo grado de asociación con la planta hospedante resulta muy poco conocido. En nuestro país se conoce poco acerca de su abundancia y patrón de colonización. El objetivo de este trabajo es el aislamiento cepas autóctonas de hongos DSE y su caracterización e identificación. Se realizaron aislamientos a partir de las raíces de diversos hospedantes y procedencias: a partir de suelos agrícolas de la provincia de Buenos Aires: Triticum aestivum (de General Arenales y Ferré), Glicine max y Coronupus didymus (de San Antonio de Areco) y Lolium multiflorum (de Carlos Casares) y a partir de diversos ambientes naturales, principalmente Puccinellia frigida, colectada en Laguna Brava (provincia de La Rioja), una laguna altoandina con condiciones climáticas extremas. Para el aislamiento se procedió a esterilizar superficialmente las raíces y luego se dejaron reposar en cajas de Petri con papel de filtro, estériles para eliminar el agua excedente y finalmente fueron cortadas en fragmentos de 5 mm aproximadamente que se sembraron en Gel Gro® en forma de gotas (40 fragmentos por planta muestreada). Las gotas fueron observadas periódicamente bajo lupa binocular y aquellos fragmentos a partir de los que se observaba crecimiento de hifas desde su interior, fueron transferidos a cajas de Petri con agar malta con antibiótico. Las colonias fúngicas obtenidas fueron repicadas hasta obtener cultivos puros. Se procedió a la identificación de los aislamientos, los que fueron agrupados en morfotipos y cultivados en diversos medios de cultivos y condiciones de temperatura de crecimiento para realizar la identificación mediante caracteres morfológicos y en medio malta líquido estático para la identificación molecular. En este último caso se realizó la extracción de ADN genómico mediante Ultra clean Microbial DNA isolation Kit (MoBio) seguido de una PCR con los primers ITS1 e ITS4. El producto de la PCR, se purificó mediante Accuprep®PCR purification Kit (Bioneer) y se secuenció en el Servicio de Secuenciación y Genotipificado de la FCEN (UBA). Las secuencias obtenidas fueron comparadas en la base de datos GenBank. Se obtuvieron 9 aislamientos de Coronupus didymus, 20 de Tritucum aestivum, 180 de Glicine max, 1 de Lolium multiflorum y 43 de Puccinellia frígida. Sólo unas pocas cepas esporularon, la mayoría identificadas como distintas especies de Alternaria y Drechslera. Las identificadas molecularmente hasta el momento, presentaron alto porcentaje de similitud con los géneros: Alternaria sp., Embellisia sp., Emerillopsis sp., Cadophora sp., Dreschlera sp., Microdochium sp., Periconia sp y Coryenespora sp. Este trabajo constituye el primer trabajo con hongos DSE en Argentina, en los que se procedió al aislamiento e identificación de los aislamientos obtenidos.