La diferenciacion neuronal involucra el ying-yang de inmunofilinas de alto PM

QUINTA HR; GALIGNIANA MD

Mar del Plata

Conferencia; LIV Reunion Anual de SAIC; 2009

SAIC

Las inmunofilinas (IMMs) existen en complejos con hsp90 y p23, siendo adem¨¢s receptores intracelulares de drogas inmunosupresoras tales como FK506. Observamos que la activaci¨®n de la IMM FKBP52 con FK506 favorece la diferenciaci¨®n de c¨¦lulas N2a hacia un fenotipo neuronal. Ensayos comparativos entre dBcAMP (un agente diferenciador est¨¢ndar), IBMX (inhibidor de fosfodiesterasas), ciclosporina A (ligando de la otra familia de IMMs, las ciclofilinas) y radicicol (inhibidor de hsp90), demostraron que FK506 tuvo el m¨¢ximo efecto sobre el largo promedio de las neuritas generadas por el tratamiento (¡Ý 120 ¦Ìm), a¨²n por sobre el de dBcAMP (~80 ¦Ìm). Ciclosporina A mostr¨® efectos t¨®xicos y radicicol un efecto sub¨®ptimo (~50 ¦Ìm). Western blots evidenciaron la inducci¨®n de marcadores de diferenciaci¨®n neuronal t¨ªpicos (Map-2, Tau y BIII-Tubulina) as¨ª como de hps90, FKBP52 y p23, mientras que los niveles de la IMM FKBP51 no se modificaron. Por microscop¨ªa confocal observamos que, tanto en c¨¦lulas N2a indiferenciadas como en cultivos primarios de embri¨®n de rata, hsp90, FKBP52 y p23 co-localizan en forma de anillo perinuclear. Al inducirse la diferenciaci¨®n, tal anillo se desensambl¨®, siendo hsp90 y FKBP52 las que migraron en primer lugar al citoplasma, concentr¨¢ndose FKBP52 en los conos de ramificaci¨®n y crecimiento rodeada por hsp90. Simult¨¢neamente, FKBP51 tom¨® el lugar de FKBP52 en el anillo perinuclear. FKBP52 colocaliz¨® mayoritariamente con Tau en los axones, los que fueron m¨¢s largos que los de neuronas no tratadas con FK506. Cuando se sobreexpres¨® a FKBP52 ¨® se hizo el knock-down de FKBP51, la cin¨¦tica de diferenciaci¨®n fue mayor. El knock-down de FKBP52 desfavoreci¨® la formaci¨®n del anillo y la diferenciaci¨®n, la que tambi¨¦n se inhibi¨® por sobre-expresi¨®n de FKBP51. Concluimos que durante la diferenciaci¨®n neuronal se produce un ying-yang entre FKBP52 y FKBP51, IMMs que parecen ser esenciales para dicho fen¨®meno.