Cristalografía de proteínas en la Plataforma Tecnológica PLABEM (Comunicación Oral)

MARÍA L. CERUTTI; LISANDRO OTERO; SEBASTIÁN KLINKE; FERNANDO A. GOLDBAUM

Bahía Blanca

Taller; VI Taller de la Asociación Argentina de Cristalografía (AACr); 2017

Asociación Argentina de Cristalografía (AACr)

La Plataforma Argentina de Biología Estructural y Metabolómica PLABEM es una de las 10 plataformas tecnológicas PPL financiadas por el MINCyT, la cual brinda servicios calificados en biología estructural y metabolómica a instituciones del sistema científico tecnológico nacional y a usuarios provenientes de las divisiones I+D del sector productivo. A nivel operativo, PLABEM se divide en dos nodos: (i) IBR-Rosario, donde se lleva a cabo espectroscopía biomolecular por RMN, control de biosimilaridad de biofármacos y metabolómica de biofluidos y mezclas complejas por RMN, y (ii) Fundación Instituto Leloir (FIL) en Buenos Aires, donde se lleva a cabo la cristalización de macromoléculas y la posterior resolución de sus estructuras tridimensionales por difracción de rayos X.El nodo FIL cuenta con un sala termostatizada de cristalización, un robot de cristalización Honeybee 963 y un difractómetro de rayos X de monocristal Bruker D8 QUEST único en el país, el cual posee una fuente microfoco de cobre, un detector de tipo CMOS de amplio rango dinámico lineal y un sistema de enfriado de muestras que permite colectar datos de difracción a 100 K. Adicionalmente, el nodo FIL cuenta con equipamiento para la caracterización biofísica de proteínas a baja resolución entre los que se destacan equipos de dispersión estática y dinámica de luz (SLS y DLS, respectivamente), los que permiten obtener información de agregación, monodispersidad y peso molecular en muestras biológicas complejas. El Instituto cuenta además con equipos de dicroísmo circular y espectrofluorómetros. En este trabajo se mostrará un resumen de los últimos resultados experimentales obtenidos en nuestro nodo [1-3], y se desarrollarán las capacidades experimentales y know-how presentes en el mismo, incluyendo la gestión del acceso a las líneas de cristalografía de macromoléculas del sincrotrón SOLEIL de Francia.Referencias: [1] A. Soldano, S. Klinke et al. & E. Ceccarelli (2017). PLoS ONE 12, e0182535. [2] M. Cerutti, L. Otero et al. & M. Aran (2017). J. Struct. Biol. 197, 201-209. [3] L. Otero, S. Klinke et al. & H. Bonomi (2016). J. Mol. Biol. 428, 3702-3720.