Phytomonas Jma: Evidencias bioquímicas de enzimas involucradas en la biosíntesis de poliaminas y el ciclo de la urea

MARCORA MS; GONZÁLEZ NS; ZADIKIAN C; ALGRANATI ID; CARRILLO C

Santa Fé, Argentina

Congreso; XXV Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Protozoología (SAP); 2009

Sociedad Argentina de Protozoologìa (SAP)

Phytomonas Jma: Evidencias bioquímicas de enzimas involucradas en la biosíntesis de poliaminas y el ciclo de la urea. MS Marcora1, C Carrillo1,2,3, NS González1,2, C Zadikian1 y Algranati, ID1,2. 1Fundación Instituto Leloir, 2CONICET, 3Dto. de Química Biológica –FCEN-UBA. e-mail: ccarrillo@leloir.org.ar     Arginina, citrulina, agmatina y ornitina son moléculas relacionadas entre sí por reacciones asociadas al metabolismo de poliaminas y al ciclo de la urea. Cada uno de ellas tiene distintos roles metabólicos según los tipos celulares. La arginina, además de ser precursor en la síntesis de proteínas, participa como metabolito intermediario en la síntesis de: a)- ornitina y urea, vía arginasa; b)- citrulina, vía arginina deiminasa; c)- citrulina y NO, vía óxido nítrico sintasa (NOS); d)- agmatina, vía arginina decarboxilasa (ADC). Agmatina, a su vez, puede ingresar a la biosíntesis de poliaminas por conversión a putrescina vía agmatinasa. La ornitina, por su parte, juega un rol fundamental como precursor de las poliaminas, dando putrescina vía ornitina decarboxilasa (ODC), enzima sensible al inhibidor difluormetil ornitina (DFMO). También participa como metabolito intermediario en el ciclo de la urea, ya sea como producto vía citrulina hidrolasa, o como precursor de citrulina vía ornitina carbamoyltransferasa. En este trabajo realizamos diversos ensayos bioquímicos para probar la presencia o ausencia de estas enzimas en un protozoo parásito de plantas, la Phytomonas Jma. Tanto en ensayos in vitro como in vivo, Phytomonas Jma 066 no presentó actividad de ADC ni formación de agmatina a partir del precursor radioactivo arginina; sin embargo, se detectó síntesis de ornitina por actividad de arginasa. Bajo las condiciones ensayadas in vivo, no se registró síntesis de citrulina a partir de arginina, sugiriendo la ausencia de arginina deiminasa y/o de NOS. Por otro lado, tampoco se detectó citrulina utilizando ornitina radioactiva como sustrato, sugiriendo también la ausencia de ornitina carbamoyltransferasa. Tanto in vitro como in vivo, Phytomonas Jma presentó actividad de ODC y formación de putrescina a partir del sustrato ornitina, siendo esta reacción inhibida por DFMO.  Finalmente, confirmamos la síntesis de espermidina, vía espermidina sintasa, a partir del precursor putrescina.