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Se han clonado y seleccionado por rastreo de bibliotecas combinatoriales de anticuerpos (Ac) humanos construidas a partir de médula osea y sangre periférica de pacientes con Cardiomiopatía Crónica de Chagas (CCCh), dos Ac reactivos contra el parásito T. cruzi. Así mismo, también se construyeron otros dos Ac a partir de dos cadenas variables pesadas (VH) y una variable liviana (VL) aisladas de células plasmáticas presentes en un infiltrado inflamatorio de cortes histológicos de corazón de un paciente con CCCh. Los cuatro Acs se expresaron en bacterias como recombinantes de cadena simple (scFv), y sus reactividades fueron ensayadas. Los scFv provenientes de bibliotecas de anticuerpos, A2R1 (VH3-73) y 6B6 (VH3-30), mostraron un fuerte reconocimiento por proteínas intracelulares del parásito en inmunofluorescencia indirecta. En ensayos de Western Blott contra lisados de T. cruzi ambos reconocen un patrón de bandas característico. Además reconocen a otros kinetoplástidos, como T. brucei y C. fasciculata y no reaccionan contra lisados celulares de mamífero y/o bacteria. Los scFv aislados del corazón, DP10 (VH1-69/JH4-5 VL1-40/JL2-3) y DP75 (VH1-2/JH6), reconocen una proteína de aproximadamente 20 kDa en WB contra lisado de T .cruzi, no siendo aún establecido si se trata de la misma proteína para ambos. Para todos los anticuerpos se estudió el uso de la cadena variable pesada, el largo y la composición de la tercera región determinante de la complementariedad (CD3) y el grado de mutaciones somáticas que presentan las regiones variables de los Acs anti-T. cruzi. Observándose que los Ac presentan signos claros de maduración frente al antígeno. Los resultados obtenidos en el presente trabajo amplían los conocimientos sobre la complejidad de la respuesta inmunitaria anti-T. cruzi en pacientes con CCCh.