Fotoinactivación de bacterias Gram positivas a partir de una nueva porfirina sintética

MAMONE, LEANDRO; FERREIRA, DARIO; DI VENOSA, GABRIELA; VALLECORSA, PABLO; SAENZ, DANIEL; CALVO, GUSTAVO; BATLLE ALCIRA; BUZZOLA, F.; DURANTINI, EDGARDO; CASAS, ADRIANA

Mar del Plata

Congreso; LX REUNION CIENTIFICA ANUAL DE LA SAIC; 2015

Sociedad Argentina de Investigacion Clinica

La terapia fotodinámica antimicrobiana (TFDA) ha surgido como un tratamiento alternativo antimicrobiano frente al cual las bacterias no podrían desarrollar resistencia. Esta modalidad emplea una molécula fotosensibilizante (FS), que es capaz de generar especies reactivas en presencia de oxígeno luego de absorber un fotón de luz visible. Las porfirinas y sus derivados modificados sintéticamente, se encuentran entre las especies químicas usualmente empleadas como FS.En este trabajo, estudiamos la acción de una nueva porfirina: 5,10,15,20-tetrakis[4-(3-N,N-dimetilaminopropoxi)fenil]porfirina (TAPP) como FS en S. aureus creciendo tanto en suspensión como biopelícula. El espaciador alifático del TAPP provee gran movilidad al grupo amino, facilitando la unión a la célula bacteriana.Evaluamos la toxicidad de TAPP en oscuridad y luego de irradiar con luz blanca (fototoxicidad o TAPP-TFDA) cultivos de Staphylococcus aureus de la cepa RN6390 en crecimiento planctónico o en biopelículas crecidas sobre poliestireno. En los cultivos planctónicos, no registramos efectos tóxicos en oscuridad empleando concentraciones de TAPP menores a 5 µM. Usando una concentración de 2,5 µM de TAPP y una dosis lumínica de 165 J cm-2, obtuvimos la erradicación total bacteriana (8 logs de reducción en la supervivencia de la fracción tratada vs el control sin tratar).Las biopelículas de S. aureus fueron menos sensibles a la fotoinactivación que los cultivos en suspensión. La toxicidad de TAPP en oscuridad se observó a concentraciones superiores a 30 µM. Luego de la irradiación (165 J cm-2), registramos fotoinactivación de la biopelícula empleando TAPP 20 µM, obteniendo una reducción de 2 logs en las UFC/ml.También analizamos los efectos de la TAPP-TFDA sobre biopelículas, por microscopía de fluorescencia luego de tinción con elkitLIVE/DEAD y por microscopía electrónica.Nuestros resultados indican que la TAPP-TFDA es promisoria para el tratamiento de infecciones de bacterias Gram positivas.