Efecto del tiempo de castración sobre la microheterogeneidad molecular de la FSH hipofisaria en la rata macho

AMBAO V; RULLI S; CALANDRA R; CAMPO S

Buenos Aires, Argentina

Congreso; XX Reunión de la Asociación Latinoamericana de Investigadores en Reproducción Humana (ALIRH); 2007

ALIRH

1Centro de Investigaciones Endocrinológicas, CONICET, Buenos Aires, Argentina. 2Instituto de Biología y Medicina Experimental, CONICET, Buenos Aires, Argentina. La microheterogeneidad molecular de la FSH se origina en las variaciones del procesamiento de sus cadenas de carbohidratos (CC), las cuales le confieren actividad biológica a la hormona. En trabajos previos hemos demostrado que durante el desarrollo sexual se modifica la abundancia relativa de isoformas de FSH hipofisaria con diferente grado de procesamiento en sus CC. El objetivo del trabajo fue evaluar el efecto del tiempo de castración sobre la microheterogeneidad molecular de la FSH hipofisaria en ratas macho adultas. Se analizaron hipófisis (n=20) de ratas macho adultas (60-70 días) en 4 condiciones experimentales: controles (C), y luego de 4 (Cx4), 10 (Cx10) y 20 (Cx20) días de castración. El contenido hipofisario y los niveles séricos de FSH se determinaron por RIE (los resultados se expresan según el standard RP-2 de rata). Se determinó la distribución de análogos de carga de FSH (isoelectroenfoque preparativo, IEF) y la abundancia relativa de isoformas de acuerdo al grado de procesamiento de CC (cromatografía en Con A), aislando: NR (no retenidas, con CC altamente ramificados), DR (débilmente retenidas, con CC biantenarias) y FR (fuertemente retenidas, con CC de tipo híbrido). El contenido de FSH hipofisaria fue: C: 3540; Cx4: 1801.8; Cx10: 3659.2 y Cx20: 4865.1 ng/hipófisis. Los niveles séricos de FSH: C: 7.83; Cx4: 19.2; Cx10: 22.67 y Cx20: 27.25 ng/ml. La FSH hipofisaria se aisló en los siguientes rangos de pH: 2.26-5.47 en C; 2.21-5.32 en Cx4; 2.39-5.75 en Cx10 y 3.05-5.83 en Cx20. La proporción de hormona más acídica (aislada por debajo de pH 3.8) fue: C: 43 %; Cx4: 29.2 %; Cx10: 25.1 % y Cx20: 18.6 % del total de hormona recuperada. Luego de la castración, la proporción de isoformas de FSH con CC altamente ramificados disminuyó concomitantemente con el aumento de la proporción de isoformas con CC  de tipo híbrido: NR: C: 53 %; Cx4: 9.1 %; Cx10: 4.8 %; Cx20: 5.2 % y FR: C: 24 %; Cx4: 48.7 %; Cx10: 65 %; Cx20:69 %. (Se muestra un ejemplo representativo de 3 experimentos). Estos resultados muestran que en la rata macho adulta la gonada modula directa o indirectamente el grado de sialización y la estructura interna de las CC de la FSH. La ausencia de gonada afectaría en mayor magnitud la actividad de las glicosidasas que intervienen en la ramificación de las CC, condicionando el posterior agregado de ácido siálico a las CC.