Construcción de un replicón de Semliki Forest Virus (SFV) recombinante capaz de expresar el inmunógeno E2 del Virus de la Diarrea Viral Bovina.

OGAS CASTELLS, LORENA; FRANCO MAHECHA; OLGA; SCODELLER, EDUARDO; CAPOZZO, ALEJANDRA; GRIGERA, PABLO.

Mar del Plata. Buenos Aires. Argentina

Jornada; 6ª Jornadas Internacionales de Veterinaria Práctica; 2009

Un avance reciente y de gran potencialidad en el uso de inmunógenos genéticos se ha dado con la introducción de sistemas basados en replicones de alfavirus, en particular Sindbis y Semliki Forest Virus (SFV). En este sistema, el gen del inmunógeno específico sustituye al de las proteínas estructurales en un replicón SFV bajo control del promotor de CMV (pCMV). Luego de la inoculación plasmídica, la síntesis de las proteínas no estructurales, componentes de la replicasa viral, es inducida in vivo. La replicasa a su vez forma transcriptos del genoma viral híbrido que servirán de templado para la amplificación y la transcripción un ARN codificante del inmunógeno elegido. En este trabajo se desarrolló un replicón híbrido de SFV capaz de expresar la glicoproteína E2 de BVDV y se verificó eficientemente su funcionalidad tanto in Vitro e in vivo. El replicón híbrido construido fue capaz de expresar la glicoproteína E2 en células transfectadas. La misma fue reconocida por un anticuerpo monoclonal específico y por sueros de animales infectados. Verificamos que las construcciones eran diferentes en cuanto a su eficiencia de expresión. La versión deletada producía mayor cantidad de E2 in Vitro. Los ensayos preliminares de inmunización en ratones mostraron que las construcciones son eficaces en expresar las glicoproteínas también in vivo. Se observa respuesta de anticuerpos contra la glicoproteína E2 a los 45 días post inmunización en los animales inoculados.