ICT - MILSTEIN   05483
INSTITUTO DE CIENCIA Y TECNOLOGIA "DR. CESAR MILSTEIN"
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
Construcción y producción de vectores amplicón derivados de Herpes Simplex–1 para la expresión transgénica de genes de rotavirus.
Autor/es:
PALACIOS, CARLOS; CLAUS, JUAN; GLIKMANN, GRACIELA; MATTION, NORA
Lugar:
Buenos Aires
Reunión:
Congreso; X Congreso Argentino de Virologia; 2008
Resumen:
Los vectores amplicón son estructuralmente idénticos a partículas de HSV-1, y poseen un rango de huésped similar, pero en lugar del genoma viral transportan un plásmido de ADN, llamado “plásmido amplicón”. Éste es un plásmido estándar de E. coli que, además de la secuencia transgénica a expresar, cuenta con un origen de replicación y una señal de empaquetamiento de HSV-1. Los vectores amplicón no contienen ningún gen de HSV-1, y por lo tanto carecen de toxicidad para las células infectadas, y de patogenicidad en los organismos inoculados. Dado que una proteína recombinante expresada en las células de un huésped inoculado con un vector amplicón puede ser potencialmente inmunogénica, estos vectores son aplicables al estudio de la respuesta inmune generada por la exposición a la proteína transgénica, además de guardar potencial como agentes vacunales. Este trabajo, realizado en el marco del proyecto FP6-2004-INCO-DEV-A.1.3–HEVAR: “Herpesvirus-based vaccines against rotavirus infections”, que involucra laboratorios de instituciones académicas de Europa y Sudamérica, tiene por objetivos construir plásmidos amplicón que expresen la proteína VP6 de Rotavirus de simio, establecer una plataforma de producción de vectores amplicón, y analizar la expresión de los transgenes en cultivos celulares. : Se construyeron plásmidos amplicón conteniendo el gen VP6 de Rotavirus de simio, o un gen reportero. Se ensamblaron los respectivos vectores amplicón, obteniéndose títulos del orden de 106 UT/ml y una relación 1:2 de vector amplicón:virus colaborador.Se detectó la presencia de las respectivas proteínas recombinantes, demostrando la factibilidad del uso de este sistema para la expresión de proteínas transgénicas, y su eventual aplicación en el estudio de la inmunogenicidad de las proteínas de Rotavirus