Producción de compuestos de interés industrial y farmacéutico mediante el uso de sistemas de cultivo in vitro vegetales.

NELSON, G; MARCONI, P; ALVAREZ, M. A

Rosario, Argentina

Simposio; XI Simposio Argentina XIV Simposio Latinoamericano de Farmacobotánica I Congreso Latinoamericano de Plantas Medicinales; 2013

Universidad de Rosario

En nuestro país la aplicación industrial de la Biotecnología ha tenido uno de sus mayores impactos en el terreno de la industria farmacéutica. Dentro de este contexto las plantas son fuente de compuestos de interés, primero de pequeñas moléculas activas (metabolitos secundarios) y desde el avance de la ingeniería genética también de proteínas terapéuticas, presentando ciertas ventajas respecto de los sistemas de producción tradicionales. Una opción muy atractiva y factible es la de encarar dichos procesos productivos utilizando cultivos in vitro. Estas plataformas ofrecen las mismas ventajas de la producción en plantas completas sin los riesgos de contaminación con pesticidas ni patógenos humanos o animales. El tabaco se destaca en este campo, entre otras ventajas, por ser particularmente susceptible a la transformación utilizando Agrobacterium como vector para la introducción del gen de interés. En este trabajo mostramos la ductilidad de los cultivos in vitro de Nicotiana tabacum para expresar tanto anticuerpos como antígenos vacunales. En el primer caso el anticuerpo 14D9, de interés en la síntesis orgánica, fue expresado con altos rendimientos tanto en raíces transformadas como en suspensiones celulares (en Erlenmeyers agitados y en bioreactor). El análisis comparativo demostró que si bien las raíces transformadas presentaban mayor velocidad específica de crecimiento (0.19 d-1) los rendimientos de 14D9 eran mayores en suspensiones celulares cultivadas en bioreactor (8.1% PTS). Por otro lado, expresamos en N. tabacum la glicoproteína E2, principal inmunógeno de la Diarrea Viral Bovina, alcanzándose niveles de expresión de hasta 20 µg ml-1 de E2. En suspensiones celulares la proteína se encontró en el medio de cultivo a partir de la fase exponencial y hasta la fase estacionaria. Utilizando el extracto vegetal se formuló una vacuna con adyuvante oleoso (Montanide®) o acuoso (hidróxido de aluminio) y se diseñó un plan de vacunación en cobayos (especie modelo) y bovinos observándose que en ambas especies se desencadenó una respuesta con anticuerpos neutralizantes específicos luego de 30 días post vacunación. Es de esperar que la obtención de mayores rendimientos de proteínas recombinantes apuntale el uso de los cultivos in vitro de tabaco como plataforma productiva.