Epigenetica y metilacion: MGMT como biomarker oncologico

GRIGERA PABLO R

CABA

Congreso; XII Congreso Nacional Bioquimico; 2013

CUBRA-ABA

Presentacion  En la actividad: Simposio ?ONCOLOGÍA. TUMOR DE COLON? Tema:  EPIGENÉTICA Y METILACION: MGMT COMO BIOMARCADOR ONCOLÓGICO   Resumen:                                                                                           La hipemetilación en la zona del promotor del gen MGMT (MGMTpro), que codifica para la proteína  O6-methylguanine-DNA methyltransferasa (MGMT) es un factor pronóstico de importancia en pacientes con glioblastoma y  predictivo de la respuesta a tratamiento con agentes alquilantes como la temozolomida. Dentro de las diversas técnicas de Biología Molecular disponibles para detectar esta modificación epigenética, la reacción de PCR-metyl específica ( MS-PCR) , es de las más sencillas, de bajo costo relativo y apropiado para  laboratorios que procesen un número bajo o mediano de muestras. En colaboración con el Laboratorio Central del HI  hemos  trabajado en el desarrollo de un protocolo de MS-PCR que permita diferenciar entre formas de  DNA genómico  metilado y no metilado en  muestras  obtenidas  de biopsias de  gliomas y tumores de colon. La amplificación diferencial  se realiza  con primers diseñados para interaccionar con  una zona rica en consensos CpG   ubicada  upstream del primer exon del gen de MGMT . La reacción es de tipo nested PCR , con  amplificación de equilibrio y  análisis de fragmentos en geles de agarosa.  Se presenta  también evidencia experimental y se discute la posibilidad de usar un formato de PCR de tiempo real que simplifica la lectura de los resultados y acorta los tiempos totales de procesamiento.