¿La proteína de la cápside de Plum Pox virus es una supresora de silenciamiento?

DEBAT, H. J.; DALZZOTO, A.; GRABIELE, M.; DUCASSE, D. A.

Córdoba

Congreso; I Congreso Argentino de Fitopatología; 2008

Asociación Argenina de Fitopatólogos

El silenciamiento génico post-transcripcional (PTGS) es un proceso de degradación secuencia-específico de RNA foráneo,como el RNA viral. Varios virus de RNA de plantas portan supresores de PTGS que anulan esta respuesta de defensa antiviral del hospedante. Presentamos aquí un reporte preliminar, en base a un ensayo de silenciamiento génico, que la cápside proteica (CP) del Plum pox virus podría actuar como supresora del PTGS. Para evaluar esta hipótesis desarrollamos 3 construcciones: el ORF del gen -N- del Tomato spotted wilt virus (TSWV-N), una construccióngeneradora de RNAi contra el gen –TSWV-N-hpRNA) y el ORF del gen de la CP-PPV, se insertaron en vectores binarios pCAMBIA 1302, bajo el control del promotor 35S. Se electroporaron a Agrobacterium tumefasciens y se inyectaron en hojas de Nicotiana benthamiana. Las hojas infiltradas fueron analizadas por DAS-ELISA 4dpi. En tejidos en los que se co-agroinfiltró TSWV-N y hpRNA se observó un fuerte silenciamiento génico que resultó en un nivel 4 veces menor de expresión de proteína -N- comparado a la hoja infiltrada solo con TSWV-N. Llamativamente cuando se co-agroinfiltraron lasa mismas construcciones simulténeamente con CP-PPV la caída en la expresión del gen TSWV-N disminuyó solo a la mitad con respecto a TSWV-N solo. Considerando que cuando CP-PPV y TSWV-N fueron co-inoculadas hubo igual expresión de proteína -N- que cuando se infiltró TSWV-N solo, podría postularse a la CP-PPV como una posible supresora del PTGS. Esta sería una nueva función aún no identificada de la CP-PPV con importantes implicancias para las interacciones planta-patógeno.