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Nothofagus (Nothofagaceae) es un género característico de los bosques del sudoeste sudamericano, Nueva Zelanda y sudeste de Australia, que comprende muchas especies de gran importancia económica por su valiosa madera. Para contribuir a un eventual mejoramiento del sistema clasificatorio del subgénero Nothofagus y profundizar el conocimiento de sus relaciones filogenéticas, se examinan por primera vez mediante bandeo de fluorescencia metafases somáticas y núcleos interfásicos de tres de sus especies integrantes, N. antarctica (3 poblaciones), N. dombeyi (1) y N. pumilio (2), además de N. obliqua (2) perteneciente al subgénero Lophozonia. Todas las especies son diploides con 2n = 2x = 26. La fórmula cariotípica más común es 10 m + 1 msm + 2 sm, presente en tres de las cuatro entidades estudiadas. La heterocromatina constitutiva es siempre CMA (cromomicina) positiva / DAPI (4-6-diamidino-2-fenilindol) negativa (enriquecida en nucleótidos GC) y su cantidad (en porcentaje de la longitud cariotípica) varía entre especies (4,34 16,51%). Las regiones organizadoras nucleolares (uno o dos pares según la especie) muestran bandas heterocromáticas asociadas, que son terminales, salvo en N. obliqua donde son intercalares. Además, todas las especies analizadas poseen bandas heterocromáticas pericentroméricas, mientras que N. obliqua presenta también un par de bandas paracentroméricas. Se registra escasa heterocigosis estructural. El patrón de bandeo con fluorocromos resulta útil para caracterizar citogenéticamente los taxones examinados, proponiéndose algunas homeologías cromosómicas entre ellos. Los resultados señalan que N. antarctica, N. dombeyi y N. pumilio están estrechamente relacionadas, mientras que N. obliqua se encuentra más distanciada, de acuerdo con la actual clasificación infragenérica. Los datos obtenidos indican que la divergencia morfológica de las especies estudiadas no siempre ha sido acompañada por una marcada diferenciación cromosómica.