Determinación de condiciones óptimas de cultivo de Pseudomonas fluorescens, cepa biotransforamnte del aceite esencail de Aloysia triphylla

OLIVA MM,; GALLUCCI NICOLAS; J. ZYGADLO; DEMO MS,

Rosario

Simposio; XI Simposio Argentino, XIV Latinoamericano de Farmacobotánica; 2013

Facultad de Ciencias Bioquimicas y Farmaceuticas - Universidad nacional de Rosario

Las plantas aromáticas producen aceites esenciales (AE), los cuales son utilizados por bacterias epifitas para ser reconvertidos en una amplia variedad de compuestos contribuyendo a ampliar el número de nuevas moléculas naturales con distintas propiedades biológicas. Las variaciones del ambiente y de los parámetros nutricionales influyen tanto en el crecimiento como en la ruta metabólica. El estadofisiológico de la biomasa celular tiene efectos directos en la bioconversión, cuando las células crecen en condiciones óptimas. P.fluorescens es resistente a numerosos AE y tiene la capacidad de utilizar terpenos como única fuente de carbono. Este grupo de investigación logró aislar una bacteria identificada como P.fluorescens de acuerdo con su RNA 16s, presente en la filósfera de A.triphylla capaz de modificar el AE exudado por la misma planta aromática. Se evaluó el crecimiento de P.fluorescens en diferentes condiciones de cultivo: temperatura (28 ºC, 37 ºC y 42 ºC), fuente de nitrógeno (medio mineral (MM) + extracto de levadura, MM+ KNO3, MM + ClNH4), pH (5 a 9) y fuente de carbono (MM + 1 % glucosa, MM + 0,1 %glucosa + 1 % AE, MM + 1 % AE). El crecimiento microbiano se midió mediante espectrofotometría a 620nm. La temperatura óptima de crecimiento en caldo tripticasa soya (CTS) fue de 28 ºC. El pH fue evaluado a 28 ºC en diferentes medios de cultivo y el óptimo fue 6. La fuente óptima de nitrógeno fue extracto de levadura presentando menor desarrollo en medios sintéticos. Las fuentes de carbono fueron evaluadas a 28 ºC, pH 6 y 7. En el MM no se observó desarrollo, mientras que en los medios con fuente de carbono orgánica hubo crecimiento inclusive solo con AE. Las velocidades de crecimiento (k) y los tiempos de generación (tg) fueron para: CTS: k = 0,30g/h; tg = 3,3h; MM + glucosa: k = 0,27g/h y tg = 3,70h y MM + AE: k = 0,35g/h, tg = 2,85 h. Los mejores valores de k y tg fueron con AE como única fuente de carbono, demostrando que esta especie vive a expensas de la sustancia existente en su medio natural. Esto indicaría la presencia de vías metabólicas degradadoras de estos sustratos, que producen intermediarios útiles e interesantes y con aplicación biotecnológica