CINÉTICA DE INHIBICIÓN DE 2´,4´-DIHIDROXI-5´-(1´´´,1´´´-DIMETILALIL)-8 PRENILPINOCEMBRINA (8PP) SOBRE LA ENZIMA TIROSINASA

MARÍA D. SANTI, MARIANA PERALTA, JOSÉ L. CABRERA, MARÍA G. ORTEGA

Carlos Paz, Córdoba

Simposio; XVIII Simposio Nacional de Química Orgánica.; 2011

Sociedad Argentina de Investigación en Química Orgánica

Dalea elegans Gillies ex Hook. & Arn., una especie autóctona que crece en nuestra provincia, ha sido ampliamente estudiada por nuestro grupo de investigación conduciendo al aislamiento y elucidación de 2 nuevas flavanonas preniladas. Una de ellas fue asignada como: 2´,4´-dihidroxi-5´-(1´´´,1´´´-dimetilalil)-6 prenilpinocembrina1, pero al momento de su elucidación estructural (1994), no se pudieron realizar experimentos de RMN en 2D, que permiten asignar inequívocamente los sustituyentes en este tipo de estructuras; de ese modo y mediante experimentos de RMN en 2D (COSY, HMBC, HMQC), se la reasignó como 2´,4´-dihidroxi-5´-(1´´´,1´´´-dimetilalil)-8 prenilpinocembrina (8PP).2 Su actividad biológica fue evaluada y demostró una importante actividad antibacteriana y antifúngica frente a cepas estándares y aisladas clínicamente 3,4 como así también actividad antiradicalaria y antioxidante e inhibición de la peroxidación lipídica cuando fue evaluada en microsomas hepáticos.5 Además se reportó una potente actividad inhibitoria de tirosinasa 2 (CI50 de 2.27 μM) comparado con el compuesto de referencia Ácido Kójico (CI50= 10.2 μM). 6 El presente trabajo de investigación tuvo por objeto la determinación de los parámetros cinéticos de la enzima tirosinasa, en presencia de 8PP. Además de estos parámetros, se determinó el tipo de inhibición presentada por dicho compuesto. Tirosinasa (200 U/ml) tuvo un comportamiento cinético del tipo Michaeliano, por lo que el valor de KM obtenido a 25º C en ausencia de inhibidor fue de 0.104±0.017µM. Por otra parte, en presencia del inhibidor 8PP los resultados a 25ºC fueron Kap= 0.176±0.169 µM, Kap= 0.295±0.057 µM a concentraciones de 8PP de 1 y 5 µM respectivamente. Estos resultados indican una inhibición del tipo reversible y competitiva La constante de inhibición (Ki) de 8PP a 25ºC fue de 2,938±0.004 µM. Este es el primer estudio que evalúa los parámetros cinéticos enzimáticos de tirosinasa en presencia de dicho compuesto, el cual podría ser utilizado para el tratamiento de patologías que cursan con anormalidades en la pigmentación de la piel o como un blanqueador en cosmética.