Infection of Human Root Canal and Dentinal Tubules: Experimental Model.

G. MARTÍN, O. GANI, G. PARAJE, AND C. VISVISIÁN.

Encuentro; IV Reunión Región Latinoamericana de la International Association for Dental Research (IADR) y XXIV Reunión Anual División Chile.; 2011

Objectives: The aim of the present study was to evaluate in vitro an experimental model for infection of human root canals and dentinal tubules with Enterococcus faecalis. Methods: 48 freshly extracted, intact human premolars were used for this experiment, distributed into 2 groups. Group A: younger than 25 year-old and Group B: older than 50 year-old. Each one was divided into two subgroups ( A1, A2, B1, and B2). Before bacteria inoculation, the root canals from the subgroups 1 were irrigated with 5,25% NaOCl, 17% EDTA and 10% Sodium Thiosulfate. The subgroups 2 were irrigated with sterile saline solution. The teeth were sterilized with ethylene oxide and then infected with Enterococcus faecalis (ATCC 29212). They were incubated for 45 days at 37º. Following this incubation, bacteriologic samples were taken, followed by serial dilutions to be plated and incubated at 37º for 48hs. The colony forming units (CFUs) grown were counted. To confirm the effectiveness of these methods, 2 teeth of each group were selected randomly to be evaluated in the scanning electron microscope (SEM). Results: Bacterial development was evident in the root canals of all groups. Bacterial populations were slightly higher in group A (8,8x 1010 CFUs) compared with group B (8,3x 1010 CFUs), but this difference reached no statistical significance (P= 0,182). There was no statistical significance (p= 0,211) between A1/B1 and A2/B2, but in subgroups A1 and B1 bacteria invaded dentinal tubules. Conclusions: The smear layer removal with NaOCl, EDTA and Sodium Thiosulfate prior to inoculation with bacteria, facilitates dentinal tubules infection. The model seems suitable for in vitro root canal and dentin infection in all age groups. Infección del Conducto Radicular y Túbulos Dentinarios Humanos: Modelo Experimental OBJETIVO: Evaluar un modelo experimental que permita la infección del conducto radicular y túbulos dentinarios humanos con Enterococcus faecalis. MÉTODO: Se seleccionaron 48 premolares humanos recién extraídos, distribuidos en: Grupo A: menores de 25 años y Grupo B: mayores de 50 años. Cada grupo, a su vez, se dividió en 2 subgrupos (A1, A2, B1 y B2) de 12 piezas cada uno. Previo a la inoculación, en los subgrupos 1 el conducto se irrigó con NaOCl 5%, EDTA 17% y Tiosulfato de sodio 10% y en los subgrupos 2 con solución salina. Luego de esterilizar los dientes con óxido de etileno, los conductos se infectaron mediante inyección con un inóculo de Enterococcus faecalis ATCC 29212. Transcurrido un período de 45 días de incubación a 37º, de cada conducto se obtuvieron muestras para ser sembradas en placas de agar e incubadas a 37º. A las 48 hs se realizó un recuento de unidades formadoras de colonias (UFC/ml). Finalmente, se seleccionaron al azar 2 dientes de cada grupo (8 en total) para ser estudiados en MEB, a los efectos de corroborar la efectividad del método de infección. RESULTADOS: En todos los grupos se observó crecimiento bacteriano. El recuento de UFC/ml fue mayor en el Grupo A (8,8x1010 CFUs) que en el B (8,3x1010 CFUs), sin embargo, aplicado el Test de Mann-Withney, las diferencias carecieron de significación (P=0,182). Tampoco fueron significativas las diferencias entre los subgrupos A1/B1 y A2/B2 (p=0,211), pero en A1 y B1 se observó desarrollo bacteriano en los túbulos dentinarios. CONCLUSIONES: El modelo es viable ya que la remoción del barro dentinario con NaOCl, EDTA y Tiosulfato de sodio, previo a la inoculación, facilita la infección dentinaria, puesto que permite, cualquiera sea la edad, que las bacterias penetren en sus túbulos.