Efecto de dos flavonoides prenilados de Dalea boliviana (Fabaceae) sobre el eflujo de Rodamina 6G en Candida albicans

PERALTA, MARIANA A.; CALISE, M; ORTEGA, M. GABRIELA; CABRERA, JOSE L.; DIEZ, ROBERTO; PEREZ, CRISTINA

Córdoba

Simposio; X SIMPOSIO ARGENTINO - XIII SIMPOSIO LATINOAMERICANO DE FARMACOBOTÁNICA; 2010

Sociedad Latinoamericana de Farmacobotánica

Los microorganismos tienen diversos transportadores que cumplen funciones vitales, además de conferirles resistencia a agentes antimicrobianos. Algunos compuestos de origen vegetal bloquean estas bombas, con lo cual incrementan la concentración intracelular de fármacos y revierten la resistencia a ellos. En trabajos anteriores demostramos que el flavonoide 2´,4´-dihidroxi-5´-(1´´´,1´´´-dimetilalil)-8-prenilpinocembrina (1), aislado de Dalea elegans Gillies ex Hook. & Arn. tiene acción dual: como antimicótico e inhibidor de las bombas de eflujo de antifúngicos en Candida albicans resistente. Posteriormente aislamos compuestos de similares características estructurales a partir de raíces de D. boliviana Britton: (2S)-5,7,2’-trihidroxi-5’-(1’’’,1’’’-dimetilalil)-8-prenilflavanona (2), (2S)-5,7,2’-trihidroxi-8,3’-diprenilflavanona (3). El objetivo de este proyecto fue evaluar los compuestos 2 y 3  sobre bombas de eflujo de antimicóticos imidazólicos. Para ello utilizamos dos cepas de Candida albicans de origen bucal : una sensible (2-76) y otra resistente (12-99) (cortesía del Dr T. White, Washington University, EE.UU). Se prepararon suspensiones de 107 células/ml, las cuales fueron incubadas en medio de cultivo YPD líquido que contenía rodamina 6G (R6G). Por citometría de flujo, a 535 nm  se midió la fluorescencia captada por las células luego de 30 min. de incubación (M1). A fin de evaluar el efecto sobre la actividad de los transportadores, se realizó una segunda incubación de 15 min. en ausencia o en presencia de los flavonoides o de verapamilo, utilizado como inhibidor de referencia, luego se midió la fluorescencia remanente (M2). La diferencia entre M1 y M2 representa el eflujo de R6G, calculado con respecto con respecto al control (levaduras no tratadas con ninguna droga). Al igual que verapamilo, los flavonoides 2 y 3, a una concentración de 250µM, disminuyeron el porcentaje de eflujo de R6G con respecto al control.  Estos resultados son compatibles con una inhibición de la(s) bombas expulsoras de antimicóticos imidazólicos de tipo ABC por parte de las flavanonas preniladas 2 y 3.