El ácido oléico estimula la migración de células de cáncer de ovario modificando la polarización y dinámica del citoesqueleto

MARIANO BISBAL; NOELIA LUJEA; PATRICIA KUNDA; MARTIN MASNER; CRISTIAN ACOSTA

Congreso; LV Annual SAIB Meeting and XIV PABMB Congress; 2019

El cáncer de ovario se desarrolla como una enfermedad de alto potencial metastásico, elevada mortalidad y limitadas opciones de efectivas de tratamiento. Las transiciones de morfología celular, interacciones célula-ambiente y célula-célula y la dinámica migratoria, determinan la dispersión de células tumorales generadoras de focos secundarios de crecimiento. Dentro de las alteraciones metabólicas características del ambiente tumoral, la acumulación diferencial de ácidos grasos insaturados como el Ácido Oleico (OL) se asocia a un fenotipo de mayor capacidad metastásica. En nuestro laboratorio investigamos los efectos del OL sobre las células tumorales de ovario, en cuanto a su influencia sobre el citoesqueleto a nivel de estructura, dinámica y polarización.Tomamos como modelo la línea celular de cáncer de ovario humano metastásico SKOV-3 y nos aproximamos al estudio de estructuras, y dinámicas de citoesqueleto de actina y tubulina combinando cultivos celulares, herramientas moleculares, microscopia de epifluorescencia y confocal de fluorescencia con células vivas, y especímenes fijados.La incorporación al medio de cultivo de OL, incrementa la migración en el modelo de ensayo de herida, mediante un efecto combinado sobre la trayectoria y orientación de las células. Se aprecian estructuras de actina más abundantes y móviles en el frente de avance de las células tratadas con OL. Paralelamente los experimentos de FRAP con LifeAct-GFP, dieron indicios de una dinámica de actina más móvil al frente respecto a la parte trasera, diferencia acentuada en las células tratadas con OL. Dicha polaridad frente/detrás fue respaldada por experimentos con las sondas de FRET de las Rho-GTPasas Rho/Rac/CDC42, donde se encontró una actividad Rac incrementada por OL en el frente. Respecto al citoesqueleto de tubulina, el reposicionamiento del MTOC hacia el frente de migración aumento en las células tratadas con OL hacia las 2hs, diferencia que se mantiene en el tiempo. Evaluando los cometas generados por EB3-Cherry, se observó un incremento de la velocidad de los mictrotúbulos del frente de migración inducido por OL. Por último se puso a punto un modelo de adherencia y migración de esferoides sobre un sustrato, para modelar este proceso característico de la metástasis ovárica en relación a la adición de OL.En conclusión apreciamos un efecto general del OL sobre la migración celular, que desencadena una actina más dinámica al frente de migración, una diferenciación en el eje frontal/posterior coherente con una lamellipodia activada por Rac, y una trayectoria más estable y derecha que condice con una inducción de la polarización del MTOC y dinámicas microtubulares. Estos hallazgos refuerzan el rol incipiente de estos ácidos grasos en la patogénesis del cáncer de ovario y abren puertas a la especulación sobre su uso pronostico y terapéutico.