IDENTIFICACIÓN DE EXOSOMAS Y SUS miARN EN TRES CEPAS DEL PARÁSITO

DE LA CRUZ THEA B; TOUZ C; MUSSO J; NATALI L; MOYANO S; MUSRI M.

Jornada; XXIV Jornadas de la Sociedad de Biología de Córdoba; 2021

Los exosomas son vesículas de 40 a 100 nm que se liberan desde diferentes tipos celulares hacia el espacio extracelular y transfierenselectivamente proteínas, lípidos, ARNm y microARN (miARN) de una célula a otra. Recientemente, hemos caracterizado el origen,forma y tamaño de vesículas extracelulares similares a exosomas (tExo, tipo-exosomas) en el aislado WB1267 del parásito Giardialamblia, que infecta a humanos. Además, encontramos que los tExo de G. lamblia contienen proteínas típicas de exosomas de otrostipos celulares, así como proteínas específicas del parásito. En este trabajo, investigamos la presencia de miARN en tExo en G. lamblia,con un enfoque particular en sus diferencias entre aislamientos. De los aislamientos de Giardia distintos de WB, el aislado GS tambiéninfecta a humanos y muestra diferencias en la patogenicidad, la tasa de crecimiento y la respuesta a fármacos. Por otra parte, estudiosfilogenéticos mostraron que WB está más relacionado con el aislado P15, que infecta cerdos, en comparación con GS. Este mismopatrón también se observó en el análisis de miARN de cada aislado. Para abordar nuestra investigación, se realizaron extracciones deARN total de los tExo de cada aislado mediante TRIzol® y se generaron bibliotecas de ADNc de ARN pequeños, como lo hemosrealizado previamente. La secuenciación se llevó a cabo en un MySeq (Illumina®). Los análisis de miARN exosómico mostraronsecuencias únicas para cada aislamiento, así como secuencias comunes entres dos o los tres aislados. Se identificaron además miARNdiferencialmente abundantes entre los grupos. En resumen, hemos identificado con éxito perfiles de miARN exosomal en 3 aisladosdiferentes de G. lamblia. La comparación de las secuencias obtenidas con los datos publicados y la anotación de nuevos miARN detrofozoítos, junto con la identificación de sus secuencias blanco, nos permitirá determinar el papel fisiológico y las funciones específicasde estos miARN en tExo del parásito. Estos resultados podrían tener un impacto en la salud humana al mejorar nuestra comprensiónde los procesos subyacentes a la infectividad, la patogénesis y la resistencia a los medicamentos de diferentes aislados de Giardia.