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El objetivo de este trabajo fue evaluar el efecto de diferentes secuencias de cultivos con fertilización nitrogenada y el efecto acumulado sobre el pH para detectar cambios y variabilidad en el mediano plazo, al final del tercer ciclo de un ensayo de largo plazo bajo siembra directa (SD) ubicado en la Chacra Experimental Integrada Barrow. El diseño es de bloques completos aleatorizados con parcela dividida. En la parcela principal se contrastan secuencias de cultivo, y en la subparcela se ensayan tres dosis de nitrógeno (N) en forma de urea. En 2016, se tomaron muestras a 0-5 cm y 5-20 cm de un ensayo de larga duración con diferentes secuencias: secuencia conservacionista; rotación mixta con verdeos; mixta con pasturas; una agrícola intensa y por último con base en oleaginosas, en todas con trigo (Triticum aestivum L.) como cultivo antecesor. Se determinó el pH por el método potenciométrico (suspensión suelo: agua 1:2,5). El ANOVA doble demostró interacción significativa (secuencia x fertilización nitrogenada). En 0-5 cm, en cada secuencia, el aumento en la dosis de N disminuyó el valor del pH de manera significativa para todas, excepto en agrícola intensa. En 5-20 cm no se halló interacción significativa, ni efectos de la secuencia y fertilización sobre el pH. El efecto acumulado de la secuencia sin aplicación de N demostró que la secuencia conservacionista y mixtas acidificaron el suelo en menor magnitud con respecto a las demás, pero este efecto solo se observó en la capa de 0-5 cm. La fertilización nitrogenada afecta al pH en las diferentes secuencias en la capa más superficial, salvo en la secuencia intensiva que produjo el detrimento del pH por su intensidad enmascarando el efecto de la fertilización. El manejo conservacionista y mixto produjeron una menor degradación del suelo con respecto a las otras secuencias.