Saneamiento de Virus en Lilium spp por cultivo de meristemas asociado a termoterapia ex vitro durante el scaling

CHINESTRA, CAROLINA; CURVETTO, NÉSTOR; MARINANGELI, PABLO

Corrientes. Argentina

Congreso; IV Congreso Argentino de Floricultura y Plantas Ornamentales, X Jornadas Nacionales de Floricultura; 2008

INTA

Entre las enfermedades que afectan al género Lilium, las causadas por virus son de especial importancia debido a que los híbridos comerciales se propagan en forma vegetativa, tornando imposible eliminar los virus durante el cultivo. Los virus más frecuentes que afectan a este cultivo son Lily symptomless virus (LSV), Lily mottle virus (LMoV) y Cucumber mosaic virus (CMV). En un programa de producción de bulbos de alta calidad es esencial disponer de material saneado de virus. El cultivo de meristemas con o sin tratamiento previo de termoterapia in vitro ha sido exitoso para sanear diferentes genotipos de Lilium infectados con los tres virus. Sin embargo la termoterapia ex vitro aplicada durante la fase de producción de bulbitos desde escamas no ha sido estudiada. En este trabajo se evaluó la efectividad de la termoterapia durante el scaling, previo al cultivo de meristemas, para la obtención de plantas libres de virus. Se utilizaron bulbos provenientes de plantas indexadas de Lilium longiflorum, híbridos Asiáticos e híbridos L/A (L. longiflorum x Asiático). Los bulbos se clasificaron según los diferentes virus y se mantuvieron en turba a 4ºC por 30 días. Las escamas desarticuladas del bulbo se desinfectaron y se colocaron en contenedores plásticos entre capas de turba para inducir la producción de bulbitos (scaling), se mantuvieron en oscuridad durante cinco semanas a 25ºC (control), o a 35ºC o 40ºC para los tratamientos de termoterapia. A partir de los bulbitos obtenidos en la base de las escamas se extrajeron los meristemas que se cultivaron en medio MS sin reguladores de crecimiento, a 25±2ºC y un fotoperíodo de 16 h (RFA 48 µmol cm-2.s-1). Se realizaron dos repiques cada tres meses en ese medio nutritivo. Transcurridos dos meses desde el último repique los microbulbos sin hojas se plantaron en sustrato y posteriormente las hojas se indexaron por DAS–ELISA utilizando Kits comerciales provistos por BQ Support (Holanda). Se analizaron 59 muestras de hojas provenientes de microbulbos obtenidos a partir de meristemas de bulbitos desarrollados sobre escamas de bulbos infectados con distintos virus antes del scaling: LSV 79,7%; LMoV 54,2% y CMV 39 %.De las 59 muestras, 28 provenían del tratamiento con termoterapia a 35°C y 31 del tratamiento control a 25°C. Todas las escamas cultivadas a 40ºC murieron y, aunque las cultivadas a 35°C sobrevivieron, produjeron un menor número de bulbitos que las del scaling a 25°C.La contaminación durante el cultivo in vitro fue de 8,2% y el porcentaje de regeneración a partir de los meristemas fue del 72,9 %. No se detectaron plantas infectadas con CMV en ningún caso y la obtención de plantas libres de LSV y LMoV se optimizó al asociar el cultivo de meristemas con un tratamiento previo de termoterapia a 35ºC durante el scaling. Así, el porcentaje de plantas infectadas con LSV respecto de los bulbos que contenían el virus fue del 10,6% en el tratamiento control y 4,3% cuando se aplicó termoterapia durante el scaling. Asimismo, el porcentaje de plantas infectadas con LMoV fue de 6,3% y 3,1% sin y con termoterapia, respectivamente. El tratamiento de termoterapia ex vitro durante el scaling previo a la etapa de cultivo in vitro se presenta como una posible técnica para aumentar la eficiencia de saneamiento de virus por cultivo de meristemas en Lilium spp.