Diferenciación de genotipos de pasto llorón (Eragrostis curvula) por marcadores RAPDs, AFLP y microsatélites

DIEGO ZAPPACOSTA; A. CARRERA; S. CARDONE; G. PACHECO; G. CERVIGNI; N. PANIEGO; MAURO MEIER; L. PIÑUEL; M. MITILLI; V. ECHENIQUE

Viña del Mar, Chile

Congreso; VI Encuentro Latinoamericano y del Caribe de Biotecnología Agropecuaria; 2007

REDBIO

El pasto llorón es una fuente importante de alimentación del ganado en las áreas subhúmedas y semiáridas de la Argentina, cubriendo actualmente unas 500.000 has. E. curvula es una especie morfológicamente diversa, que incluye materiales con distintos niveles de plodía (desde 2x hasta 8x, con x=10) y la mayoría de los miembros se reproduce en forma apomíctica. La clasificación taxonómica dentro de esta especie es dificultosa debido a que aun cuando existe variabilidad morfológica, ciertos cultivares no pueden ser claramente distinguidos. Para la identificación de los materiales cultivados se han utilizado caracteres morfológicos, agronómicos y bioquímicos. El presente trabajo tuvo como objetivos: i) evaluar la homogeneidad intracultivar, ii) establecer las relaciones genéticas entre cultivares y iii) caracterizar nuevos materiales obtenidos a partir de cultivo in vitro utilizando marcadores de ADN. Se evaluaron 11 cultivares: Don Walter (DW), Don Juan (DJ), Don Pablo (DP), Don Eduardo (DE), Krondraai (K), Don Arturo (DA), Ermelo (E), Morpa (M), Tanganyika (T), Bahiense (B) y Victoria (V) y el genotipo UNST1112 (U). Las semillas de nueve de los cultivares fueron provistas por la EEA Anguil-INTA y se analizaron 15 individuos por cultivar. De los genotipos sexuales B, V y U, obtenidos en nuestro laboratorio, se analizó un individuo. Se utilizaron ocho primers de RAPDs, cinco combinaciones de primers de AFLP y 13 primers de microsatélites (SSR) desarrollados en nuestro laboratorio a partir de genotecas de ESTs. Los productos de amplificación se separaron en agarosa o acrilamida y se calcularon los índices de Jaccard de similitud mediante NTSyS. Al evaluar la uniformidad dentro de cada genotipo, los cultivares apomícticos M y DE mostraron variabilidad en sus patrones moleculares por lo que no fueron considerados en el análisis posterior. Se hallaron marcadores polimórficos con RAPDs (56), AFLP (39) y SSR (26). Los agrupamientos formados basados en los tres tipos de marcadores, fueron diferentes entre sí. Con AFLP se logro diferenciar DA y E que son indistinguibles morfológicamente. Los nuevos materiales generados resultaron diferentes de los cultivares tradicionales. Los agrupamientos logrados con AFLP y SSR fueron los más similares entre sí y coinciden parcialmente con la clasificación agronómica.