Clonado y caracterización del cADN de la enzima cafeoil CoA-O-metiltransferasa (CCoAOMT) de Eragrostis curvula.

DIAZ MARINA; MOIRANO NATALIA; GARBUS INGRID,; CERVIGNI GERARDO; PANIEGO NORMA; SPANGENBERG GERMAN; ECHENIQUE VIVIANA

Viña del Mar, Chile

Congreso; VI Encuentro Latinoamericano y del Caribe de Biotecnología Agropecuaria REDBIO; 2007

REDBIO

Clonado y caracterización del cADN de la enzima cafeoyl Co A 0-metiltransferasa (CCoAOMT) de Eragrostis curvula En las gramíneas forrajeras se ha observado una disminución de la digestibilidad de la materia seca a medida que crecen y maduran, reduciendo el valor nutritivo del forraje, debido en parte a la lignificación de las paredes celulares. Eragrostis curvula, forrajera cultivada en zonas semiáridas de la Argentina no resulta ajena a este fenómeno, observándose un descenso de la digestibilidad al alcanzar el estado reproductivo. El objetivo de este trabajo fue el clonado y la caracterización del cADN de CCoAOMT  a fin de utilizarlo en experimentos de transgénesis para regular negativamente la expresión de este gen en pasto llorón. A partir de una genoteca de ADNc compuesta por 3644 ESTs del cultivar Tanganyica (2n=4X=40), utilizando el algoritmo BLASTX, se identificó el clon correspondiente a la mencionada enzima. Mediante Southern blot se determinó el número de copias del mismo en el genoma de E. curvula. Utilizando el programa MEGA (versión 3.1) se realizó el análisis filogenético. El cADN de CCoAOMT de Eragrostis curvula tiene una longitud de 1100 pb con un contenido de G+C de 65,26%. Incluye una región no codificante en el extremo 5´ de 68 pb y otra de 249 en el 3´. Se observaron al menos dos copias o formas alélicas del mismo.  El marco de lectura de mayor tamaño incluye 261 aminoácidos con un peso molecular aproximado para la proteína de 29.296,84 Da. El árbol filogenético basado en las secuencias de aminoácidos de CCoAOMT muestra una completa concordancia con los grandes grupos taxonómicos de plantas. Los análisis utilizando BLASTX contra las bases de datos SwissProt y Trembl mostraron porcentajes de similitud que varían entre 92 y 84% para las distintas secuencias de maíz, 92% para arroz y valores entre el 84 y 78% para especies de dicotiledóneas. La identificación y caracterización de este clon resulta de interés debido a que a partir del mismo se planea la construcción de vectores para la transformación genética de esta gramínea a fin de mejorar la calidad de su forraje.