Saneamiento y detección de virus en Lilium

CHINESTRA C, MARINANGELI P

AgroUNS

Departamento de Agronomía. Universidad Nacional del Sur

Lugar: Bahía Blanca; Año: 2011 p. 23 - 27

1668-5946

Los virus más comunes que afectan al género Lilium son Lily Symptomless Virus, Lily Mottle Virus y Cucumber Mosaic Virus. En Argentina se detectaron los tres virus, con diferente incidencia dependiendo de las localidades e híbridos analizados. En nuestro país, la producción de bulbos de Lilium es escasa y la industria de flores es provista principalmente de Holanda. Las regiones de producción de bulbos más importantes se encuentran en el NO de la provincia de Chubut. Recientemente, algunos pequeños productores han iniciado la producción en el sur de la provincia de Buenos Aires y en Malargüe, Mendoza. Los bulbos producidos en estas regiones son vendidos a productores de flor de corte en todo el país, que están localizados cerca de los centros urbanos y en regiones con condiciones agro-climáticas favorables. Es importante destacar que en ninguno de los casos se hace un seguimiento de la infección viral con eliminación de plantas sintomáticas a campo ni se controla la sanidad del material inicial. Síntomas: Las infecciones virales en Lilium causan anormalidades del crecimiento y desarrollo como reducción del porte, flores más pequeñas y deformes, y menor rendimiento de bulbos. Los síntomas difieren en severidad de acuerdo al virus presente, a la susceptibilidad y sensibilidad del cultivar y a las condiciones de crecimiento, ya sea a campo o invernáculo. Cuando se producen flores de corte en invernáculo los síntomas se hacen más evidentes, particularmente bajo condiciones ambientales desfavorables. Obtención de plantas libres de virus: El cultivo de meristemas con o sin tratamiento previo de termoterapia in vitro ha sido exitoso para sanear diferentes genotipos de Lilium. Asimismo, puede asociarse el cultivo de meristemas y/o termoterapia a tratamientos con compuestos antivirales. El cultivo de meristemas consiste en el aislamiento y cultivo in vitro del domo meristemático acompañado por uno o dos primordios foliares, en medio MS, a 25ºC con 16 hs luz y 8 hs oscuridad. El tratamiento de termoterapia consiste en la exposición de plantas u órganos a altas (30 – 40ºC) o bajas (5-15ºC) temperaturas. Se utiliza en combinación con cultivo de meristemas, ya que si bien permite reducir la concentración viral, al volver a la temperatura inicial aumenta nuevamente dicha concentración. La quimioterapia implica la utilización de sustancias químicas que disminuyen la concentración viral. La más utilizada es la ribavirina, un análogo de guanina que actúa bloqueando la replicación viral. Se debe considerar que puede producir toxicidad dependiendo de la dosis empleada. Se emplea en combinación con cultivo de meristemas. Una vez obtenidas las plantas libres de virus, se debe mantener una línea madre que será fuente de propágulos para multiplicación. En esta etapa se debe procurar que la reinfección sea mínima o no tenga lugar. Esto se logra por medio de la perpetuación y conservación en cultivo in vitro, en invernáculos o zonas aisladas de focos de contaminación. Diagnóstico de virus: Dentro de los métodos de detección de virus se pueden mencionar la observación de síntomas, el serodiagnóstico, la visualización por microscopía electrónica y las técnicas moleculares. La observación de síntomas permite eliminar plantas que presentan infección viral evidente. Sin embargo, es un método impreciso, ya que en ocasiones se eliminan plantas que presentan anormalidades fisiológicas reversibles. Los métodos serológicos se basan en la especificidad de la reacción antígeno-anticuerpo. Dentro de las técnicas serológicas que se han empleado para diagnóstico de virus en Lilium se pueden mencionar DAS-ELISA y NC-ELISA o dot blot. Por medio de microscopía electrónica se ha podido observar la morfología de los viriones y la citopatología por medio de cortes ultrafinos. La reacción en cadena de la polimerasa posterior a la reacción de transcripción reversa (RT-PCR) es ampliamente utilizada para el diagnóstico de virus de ARN donde es necesario obtener una cadena de ADNc previo a la amplificación por medio de la enzima DNA polimerasa. El LSV, LMoV y CMV son virus de ARN de cadena positiva, por lo que el ARN viral actúa como ARN mensajero. Las técnicas moleculares presentan una mayor sensibilidad que las serológicas por lo que permiten la detección de los virus aún en muy bajas concentraciones. Esquema para la producción de plantas libres de virus: La Organización Europea y Mediterránea de Protección de plantas presenta un esquema con los pasos necesarios para asegurar un estándar de plantas de Lilium libres de virus. Si bien a nivel nacional no existe una reglamentación para la importación u obtención de material de Lilium certificado como libre de virus, es recomendable la utilización de material saneado para la propagación a campo, ya que la utilización de material infectado incrementará el número de plantas que sirvan como fuente de inóculo en el cultivo siguiente. La utilización de material libre de virus puede implicar un mayor tiempo y costo inicial, sin embargo permite la obtención de material de mayor calidad. Alcances de la generación de biotecnología para la obtención de plantas libres de virus. La generación de tecnología propia para producción de bulbos de Lilium libres de virus se presenta ante la necesidad de sustituir la importación de bulbos por bulbos producidos en el país, de alta calidad y a menor costo. La obtención de plantas libres de virus sólo es posible a través de cultivo in vitro previo a la etapa de propagación. Esta tecnología no se está aplicando para lilium en nuestro país, al igual que la detección de virus. Así, una condición indispensable para la producción comercial de bulbos es contar con un sistema de saneamiento de virus y de monitoreo de los cultivos. El ajuste de estas técnicas permitiría garantizar un producto apto para el mercado interno de flor de corte y para la exportación.