Aislamiento y caracterización de un gen de resistencia a Microcina J25 en Escherichia coli

PAZ GARCÍA, ENRIQUE CARLOS; SOCÍAS, SERGIO BENJAMÍN; SALOMÓN, RAÚL ARMANDO

San Miguel de Tucumán - Tucumán

Jornada; V Jornadas de Jóvenes Investigadores de la UNT; 2012

Universidad Nacional de Tucumán

La microcina J25 (MccJ25) es un péptido antibiótico que actúa en 2 niveles: inhibe la transcripción y produce estrés oxidativo en las células sensibles. En este trabajo, mediante la técnica del clonado in vivo empleando como donante una cepa parcialmente resistente a MccJ25, se logró aislar un fragmento de ADN cromosómico de Escherichia coli que confiere resistencia parcial al antibiótico. Tras sucesivos subclonados se construyó un plásmido (designado pAC521E), el cual confiere resistencia a MccJ25 y que contiene un fragmento de ADN cromosomico de E. coli conteniendo sólo los genes znuABC, implicados en el metabolismo del zinc. Ninguno de ellos ha sido relacionado previamente con resistencia a MccJ25, lo que indica que se trata de nuevos marcadores de resistencia al antibiótico. Diversas pruebas fenotípicas demostraron que esta resistencia no se debe al bombeo activo de la MccJ25 entrante al medio extracelular ni a un ingreso disminuido del antibiótico a la célula. Sin embargo, ensayos adicionales sugieren que este fenotipo sería una consecuencia del aumento de la concentración intracelular de zinc, lo cual a su vez incrementa la resistencia celular a las especies reactivas del oxígeno, aliviando de esta forma el estrés oxidativo producido por la MccJ25 en las células sensibles.