Síntesis de laurato de 6``-glucósido de hesperetina: Efecto del solvente y la temperatura

RAMÓN ENRIQUE DÍAZ; GUSTAVO CÉLIZ; MIRTA DAZ

Rosario

Congreso; XVIII Congreso Argentino de Fisicoquímica y Química Inorgánica; 2013

Asociación Argentina de Investigación Fisicoquímica

Los flavonoides son compuestos polihidroxilados derivados del difenilpirano presentes en fuentes vegetales como ser los cítricos, recurso de importancia en la región noroeste de nuestro país. A pesar de las importantes propiedades biológicas que se les atribuyen, los flavonoides poseen un mercado limitado, tal vez debido a la baja solubilidad que poseen tanto en matrices acuosas como lipídicas. Para aumentar la solubilidad en matrices grasas se ha propuesto esterificar los grupos hidroxilos con grupos lipofílicos a través de reacciones catalizadas por lipasas. El objetivo de este trabajo fue estudiar el efecto del solvente y de la temperatura sobre la síntesis del éster laurato de 6?-O-glucósido de hesperetina (LGH) a partir de glucósido de hesperetina (GH) y laurato de vinilo (LV) catalizando la reacción con una lipasa comercial inmovilizada (CALB de Novozym 435). Figura1: Esquema de la síntesis de éster laurato de 6??-O-glucósido de hesperetina La síntesis se llevó a cabo en reactores (25 mL) con tapas herméticas. Los medios de reacción se prepararon con GH (5 mM), LV (50 mM) y tamiz molecular (35 mg mL-1), volumen final 12 mL. Los reactores se colocaron en baño termostático con agitación (190 rpm) a distintas temperaturas (40-80 ºC). Las reacciones se iniciaron con el agregado de lipasa (4.2 mg mL-1) y a tiempos regulares se tomaron muestras (100 µL) que se analizaron por HPLC usando una columna ZORBAX SB-C8 HP (4.6 mm x 250 mm) en condiciones isocráticas (AcN:H2O, 80:20 y flujo de 0.7 mL min-1) con detección UV a 280 nm. Se determinaron concentraciones de LGH en función del tiempo y a partir de estas, las velocidades iniciales (Vi) para cada condición de síntesis. Los resultados mostraron que al aumentar la hidrofobicidad del solvente, también aumentaron las Vi. Por otra parte, las Vi siempre fueron mayores al aumentar la temperatura. El análisis conjunto de ambos efectos permitió establecer una correlación lineal entre la hidrofobicidad del solvente (log P) y la energía de activación (Eact), considerando comportamiento Michaeliano con baja saturación de enzima (cinética de pseudo 1º orden) y una dependencia de la constante de velocidad tipo Arrhenius. El comportamiento encontrado sugiere que la etapa limitante en el mecanismo de síntesis de LGH es la formación de un intermediario iónico y que la formación de dicho intermediario se ve favorecida en presencia de solventes de alta polaridad (bajo log P), lo que conduce a menores Eact y por ende a mayores Vi.