Influencia de la distribución lateral de dominios lipídicos, sobre la remoción de Colesterol mediada por apoA-I. Mecanismos de compensación celular.

JAUREGUIBERRY, M. S.; FINARELLI, G. S.; SANCHEZ, S. A.; GONZALEZ, M. C.; TRICERRI, M. A.; RIMOLDI. O. J.

Rosario, Santa Fe

Jornada; Jornadas Nacionales de Lípidos.; 2008

La interacción de la apolipoproteína A-I (apoA-I) con células y su capacidad para remover colesterol (Col) dependen de la composición y organización lateral de lípidos en la membrana.plasmática (MP). En este trabajo investigamos la influencia de la distribución lateral de dominios lipídicos sobre la de remoción de Col celular mediada por apoA-I. La sobreexpresión de estearoil Coa desaturasa (SCD-1) en células CHO (CHO-SCD) induce un enriquecimiento de la membrana en ácidos grasos (AGs) monoinsaturados a expensas de los saturados y sin alteración de los poliinsaturados. Así, construimos esta línea celular como modelo para inducir cambio en fosfolípidos de MP. La composición de AG fue confirmado por GLC detectando un aumento relativo de ~ 2 veces en la relación 16:1/16:0 y 18:1/18:0. Sin embargo, la fluidez total de membrana, así como la actividad reductora mitocondrial permaneció inalterada, indicando un mecanismo compensador a fin de mantener el funcionalismo celular. Para caracterizar la importancia de la MP en estos procesos, sometimos a las células a alteraciones en el contenido de Col. Mientras que la sobrecarga resultó más tóxica para las CHO control que para CHO-SCD, la apoA-I removió Col con menos eficiencia de éstas últimas, las que presentan un aumento en la relación Col libre/Col esterificado (CE) celular. Asimismo, mediante análisis de Polarización Generalizada (GP) del Laurdan por microscopía de fluorescencia bifotónica se detecta que el Col es removido de distintos dominios lipídicos en ambos tipos celulares.  Estos datos sugieren que el aumento de la fluidez inducido por la sobreexpresión de la SCD, sería compensado por un aumento de Col (a expensas del CE intracelular), y una distribución diferencial del mismo en los dominios de la MP. Esto resultaría en una disminución de la remoción de este lípido por la apoA-I, probablemente por estar localizado preferentemente en dominios de distinta accesibilidad a la proteína.