Especies intermedias en la agregación de la apolipoproteína A-I: probable rol en la amiloidosis

RAMELLA, N.; ROSU, S. A.; FINARELLI, G. S.; GADDI, G. M.; TRICERRI, M. A.

La Plata

Congreso; II Congreso Internacional Facultad Cs. Médicas; 2015

Facultad de Ciencias Médicas de la UNLP

IntroducciónLas amiloidosis son patologías crónicas, en las que proteínas mal plegadas inducen citotoxicidad de distinta severidad y en distintos órganos. Si bien gran cantidad de bibliografía sugiere que agregados fibrilares maduros serían la especie con mayor patogenicidad, estudios más recientes indican que oligómeros o protofibras, podrían jugar un rol fundamental en la cascada de eventos involucrados en la amiloidosis. La amiloidosis inducida por mutantes naturales de la apolipoproteína A-I humana (apoA-I) se presenta con diversas manifestaciones clínicas dependiendo de la variante proteica que se encuentra involucrada. En estudios previos determinamos que distintas variantes de esta proteína poseen aumentada tendencia a agregarse, y que parámetros pro-inflamatorios del micro ambiente favorecen un procesamiento patogénico. objetivosEn este trabajo extendemos nuestros estudios, y nos planteamos resolver la hipótesis de que distintas especies intermedias participen en procesos citotóxicos mediados por variantes de apoA-I. material y métodoSe obtuvieron y purificaron por técnicas tradicionales de Biología molecular variantes de apoA-I con las secuencias naturales identificadas en pacientes. Se aislaron mediante centrifugación conformaciones proteicas obtenidas luego de la incubación de los mutantes Gly26Arg y Lys107-0 a pH ligeramente fisiológico y ligeramente acídico a 370C. La conformación de las especies soluble y agregados fueron estudiadas por técnicas biofísicas y bioquímicas como fluorescencia, dicroísmo circular, microscopía de fuerza atómica, etc. resultados y conclusionesDeterminamos y caracterizamos la coexistencia de estructuras con distinta conformación y solubilidad de variantes de apoA-I que inducen amiloidosis en pacientes, lo que sugiere, de manera interesante, que pueda haber distintas estructuras participantes en la patogenicidad de estas proteínas. A futuro estudiaremos el mecanismo pro-tóxico de las mismas a fin de intentar modular su plegamiento e inhibir el daño orgánico.