INIBIOLP 05426
INSTITUTO DE INVESTIGACIONES BIOQUIMICAS DE LA PLATA "PROF. DR. RODOLFO R. BRENNER"
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
Glucocorticoides como reguladores de la expresión génica en macrófagos humanos
Autor/es:
DÍAZ LUDOVICO IVO; ESTEVE RAFOLS, MONTSERRAT; LEDDA, ANGELO; GRASSA, MARÍA DEL MAR; TOLEDO, J. D.; GARDA, H. A.; GONZALEZ MARINA CECILIA
Lugar:
La Plata
Reunión:
Jornada; Jornadas de Ciencias médicas; 2014
Institución organizadora:
Facultad de Ciencias Médicas de La Plata
Resumen:
TITULO:
Glucocorticoides como reguladores de la expresión génica en macrófagos humanos
Autores:
Díaz Ludovico, I.1, Ledda, A.2,
Esteve Rafols, M.2, Grasa, M.2, Toledo, J.1,
Garda, H.1,
Gonzalez, M1.
Lugar
de Trabajo:
1La
Plata, INIBIOLP, UNLP, Argentina; 2 Dto. Nutrición y
Bromatología, Universidad de Barcelona.
e-mail
de contacto (IMPORTANTE): diazludovico@gmail.com
Introducción:
Los glucocorticoides son antiinflamatorios
que actúan en la resolución de la inflamación mediante la activación de
macrófagos por la vía alternativa M2c anti-inflamatorios, entre otras acciones.
Se considera que los glucocorticoides están implicados en el desencadenamiento
y/o mantenimiento de la obesidad, tal como se ha postulado para la
aterosclerosis.
A nivel de tejidos periféricos, entre ellos
las células del sistema inmune, la señal glucocorticoide puede verse
amplificada o inhibida por la actividad de las enzimas 11β-hidroxiesteroide
deshidrogenasa de tipo 1 (11βHSDH1) y de tipo 2 (11βHSDH2), respectivamente. La
expresión de 11βHSD1 está involucrada en la reducción de cortisona a cortisol
(forma activa del glucocorticoide) y la 11βHSDH2 transforma al cortisol en cortisona
(glucocorticoide inactivo).
Objetivos:
-
Evaluar el efecto del cortisol y cortisona sobre la
expresión de genes involucrados en la respuesta pro-inflamatoria como TNFα, FAT/CD36, IL6 y en el proceso
anti-inflamatorio como 11ßHSD1, rIL10, MMR.
Materiales
y métodos:
-
Monocitos humanos de la línea THP1 fueron transformados en macrófagos
por la adición de ésteres de forbol (PMA) en el medio de cultivo. Macrófagos
THP1 fueron tratados con LDL-Ox/cortisol, LDL-Ox/cortisona o
LDL-Ox/cortisona/BVT 2733 (inhibidor específico de 11ßHSD1) alternativamente por 24 horas. La fracción de LDL fue aislada
de plasma humano y peroxidada in vitro con Cu++ para transformarla
en LDL-Ox. El ARNm de los distintos genes fue medido por el método cuantitativo
de PCR en tiempo real.
Resultados:
-
Los resultados muestran una disminución de los marcadores
pro-inflamatorios en células tratadas con dosis crecientes de cortisol.
También, los tratamientos realizados con una dosis elevada de cortisona
(1000nM) mostraron una disminución en la expresión de genes pro-inflamatorios.
Sin embargo, cuando los macrófagos fueron incubados con altas dosis de
cortisona junto al inhibidor BVT 2733 no se observa la disminución en la
respuesta pro-inflamatoria.
-
Cuando los macrófagos son incubados con dosis crecientes de cortisol se
observa una disminución en la expresión del gen de la 11ßHSD1 y un incremento de la
expresion de la 11ßHSD2, sugiriendo la conversión del cortisol en cortisona.
