Enzimas de hongos entomopatógenos participantes en la degradación de lípidos cuticulares de insecto, en simposio: Sistemas enzimáticos: roles en la biología de los hongos y sus aplicaciones

N. PEDRINI; M.P. JUÁREZ

Posadas

Congreso; XII Congreso Argentino de Micología: XXII Jornadas Argetinas de Micología; 2011

Asociación Argentina de Micología

Los hongos entomopatógenos poseen un excelente potencial como agentes de control biológico para una gran variedad de insectos plaga. La infección fúngica comienza por la penetración a través de la cutícula del insecto, cuya capa más externa está compuesta por una delgada capa de lípidos. En esta cubierta predominan hidrocarburos de muy larga cadena que son degradados por los hongos como parte de las etapas iniciales de infección, que incluyen adhesión de los conidios y posterior penetración de los mismos a través de la cutícula. En este trabajo se describe el rol de varias enzimas de Beauveria bassiana involucradas en la degradación de lípidos cuticulares de insecto, entre las que se destacan citocromo P450 monooxigenasas (P450), catalasas (CAT) y benzoquinona reductasas (BQR). Asimismo, se discute su participación como factores de virulencia. Los genes codificantes para varias de estas enzimas fueron obtenidos mediante RACE y caracterizados molecularmente, incluyendo 8 isoformas de p450, 3 cat y 1 bqr; así como regiones repetitivas en sus respectivos promotores. Se comprobó a través de PCR cuantitativa a tiempo real que estos genes están significativamente inducidos cuando B. bassiana crece en lípidos de insecto como única fuente de carbono, con expresiones que van desde 40 (bqr) hasta 200 veces (p450) mas elevadas que en los controles. Asimismo, las actividades enzimáticas de CAT y BQR se encontraron aumentadas en hongos crecidos en lípidos de insecto. La inducción de estos parámetros bioquímicos y moleculares se correlaciona con un incremento de la virulencia fúngica, logrando un mayor porcentaje de mortalidad en un tiempo menor. Estos resultados muestran que las enzimas mencionadas cumplen un papel importante durante la degradación cuticular. Se han iniciado estudios de knockout de estos genes para confirmar su participación en estos procesos, así como la generación de cepas fúngicas con copias adicionales de los mismos, con el objetivo de optimizar el funcionamiento de estos micoinsecticidas en el control específico de insectos plaga. Estos resultados muestran que las enzimas mencionadas cumplen un papel importante durante la degradación cuticular. Se han iniciado estudios de knockout de estos genes para confirmar su participación en estos procesos, así como la generación de cepas fúngicas con copias adicionales de los mismos, con el objetivo de optimizar el funcionamiento de estos micoinsecticidas en el control específico de insectos plaga. Los genes codificantes para varias de estas enzimas fueron obtenidos mediante RACE y caracterizados molecularmente, incluyendo 8 isoformas de p450, 3 cat y 1 bqr; así como regiones repetitivas en sus respectivos promotores. Se comprobó a través de PCR cuantitativa a tiempo real que estos genes están significativamente inducidos cuando B. bassiana crece en lípidos de insecto como única fuente de carbono, con expresiones que van desde 40 (bqr) hasta 200 veces (p450) mas elevadas que en los controles. Asimismo, las actividades enzimáticas de CAT y BQR se encontraron aumentadas en hongos crecidos en lípidos de insecto. La inducción de estos parámetros bioquímicos y moleculares se correlaciona con un incremento de la virulencia fúngica, logrando un mayor porcentaje de mortalidad en un tiempo menor. Estos resultados muestran que las enzimas mencionadas cumplen un papel importante durante la degradación cuticular. Se han iniciado estudios de knockout de estos genes para confirmar su participación en estos procesos, así como la generación de cepas fúngicas con copias adicionales de los mismos, con el objetivo de optimizar el funcionamiento de estos micoinsecticidas en el control específico de insectos plaga. Estos resultados muestran que las enzimas mencionadas cumplen un papel importante durante la degradación cuticular. Se han iniciado estudios de knockout de estos genes para confirmar su participación en estos procesos, así como la generación de cepas fúngicas con copias adicionales de los mismos, con el objetivo de optimizar el funcionamiento de estos micoinsecticidas en el control específico de insectos plaga. Beauveria bassiana involucradas en la degradación de lípidos cuticulares de insecto, entre las que se destacan citocromo P450 monooxigenasas (P450), catalasas (CAT) y benzoquinona reductasas (BQR). Asimismo, se discute su participación como factores de virulencia. Los genes codificantes para varias de estas enzimas fueron obtenidos mediante RACE y caracterizados molecularmente, incluyendo 8 isoformas de p450, 3 cat y 1 bqr; así como regiones repetitivas en sus respectivos promotores. Se comprobó a través de PCR cuantitativa a tiempo real que estos genes están significativamente inducidos cuando B. bassiana crece en lípidos de insecto como única fuente de carbono, con expresiones que van desde 40 (bqr) hasta 200 veces (p450) mas elevadas que en los controles. Asimismo, las actividades enzimáticas de CAT y BQR se encontraron aumentadas en hongos crecidos en lípidos de insecto. La inducción de estos parámetros bioquímicos y moleculares se correlaciona con un incremento de la virulencia fúngica, logrando un mayor porcentaje de mortalidad en un tiempo menor. Estos resultados muestran que las enzimas mencionadas cumplen un papel importante durante la degradación cuticular. Se han iniciado estudios de knockout de estos genes para confirmar su participación en estos procesos, así como la generación de cepas fúngicas con copias adicionales de los mismos, con el objetivo de optimizar el funcionamiento de estos micoinsecticidas en el control específico de insectos plaga. Estos resultados muestran que las enzimas mencionadas cumplen un papel importante durante la degradación cuticular. Se han iniciado estudios de knockout de estos genes para confirmar su participación en estos procesos, así como la generación de cepas fúngicas con copias adicionales de los mismos, con el objetivo de optimizar el funcionamiento de estos micoinsecticidas en el control específico de insectos plaga. p450, 3 cat y 1 bqr; así como regiones repetitivas en sus respectivos promotores. Se comprobó a través de PCR cuantitativa a tiempo real que estos genes están significativamente inducidos cuando B. bassiana crece en lípidos de insecto como única fuente de carbono, con expresiones que van desde 40 (bqr) hasta 200 veces (p450) mas elevadas que en los controles. Asimismo, las actividades enzimáticas de CAT y BQR se encontraron aumentadas en hongos crecidos en lípidos de insecto. La inducción de estos parámetros bioquímicos y moleculares se correlaciona con un incremento de la virulencia fúngica, logrando un mayor porcentaje de mortalidad en un tiempo menor. Estos resultados muestran que las enzimas mencionadas cumplen un papel importante durante la degradación cuticular. Se han iniciado estudios de knockout de estos genes para confirmar su participación en estos procesos, así como la generación de cepas fúngicas con copias adicionales de los mismos, con el objetivo de optimizar el funcionamiento de estos micoinsecticidas en el control específico de insectos plaga. knockout de estos genes para confirmar su participación en estos procesos, así como la generación de cepas fúngicas con copias adicionales de los mismos, con el objetivo de optimizar el funcionamiento de estos micoinsecticidas en el control específico de insectos plaga.