Inhibición génica vs farmacológica del receptor de mineralocorticoides cardíaco.

AMADO NICOLÁS; LEPORACE J; CHIAPPE DE CINGOLANI GE; CINGOLANI HE; MORGAN PE; CALDIZ CI

Rosariio

Congreso; XX Congreso Argentino de Hipertensión Arterial; 2013

Sociedad Argentina de Hipertensión Arterial

TITULO DEL TRABAJO. INHIBICION GÉNICA VS FARMACOLÓGICA DEL RECEPTOR DE MINERALOCORTICOIDES (MR) CARDÍACO Amado Nicolás, Leporace J, Chiappe de Cingolani GE, Cingolani HE, Morgan PE y Caldiz CI. Centro de Investigaciones Cardiovasculares, Facultad de Ciencias Médicas –UNLP-CONICET 60 y 120s/n La Plata. Tel 0221-4834833. e mail: clacaldiz@med.unlp.edu.ar Se ha demostrado que la Aldosterona (Ald) aumenta la producción de especies reactivas del oxígeno (EROS) en el miocardio, efecto que se suprime con bloqueantes del MR como la Spironolactona (Sp) y Eplerrenona (Epl). El mecanismo de acción benéfica de estos compuestos en la insuficiencia cardiaca (IC) aun no está totalmente esclarecido. Estos inhibidores poseen efectos inespecíficos, pudiendo actuar como agonistas inversos y aun ejercer efectos a través de receptores distintos del MR. Lo dicho anteriormente plantea la disyuntiva de saber si el efecto benéfico de los mismos se ejerce a través del bloqueo de MR u otro mecanismo. El propósito de este estudio es silenciar específicamente, el receptor MR miocárdico por medio de la técnica de RNA de interferencia y así deslindar y evitar los efectos inespecíficos de estos bloqueantes. Se utilizaron dos protocolos, Farmacológico: en cortes de tejido cardíaco provenientes de ratas controles (C) se determinó la producción de superóxido (O-2) en respuesta a Ald, por el método de lucigenina y el efecto de los bloqueantes del MR mencionados anteriormente. Génico: se inyectaron animales con un RNA de interferencia contra el MR (siRNAMR) o su secuencia scramble correspondiente (siRNASCR), incorporado a un lentivirus. Luego de 4 semanas de inyectados los animales fueron sacrificados, se extrajo el corazón y se utilizaron los cortes del ventrículo izquierdo para determinar en los mismos la producción de O-2. El uso del siRNA MR disminuyó en un 57 ± 5.8 % la expresión de la proteína del MR. La expresión del MR en otros órganos no se vio afectada. El aumento en la producción de O-2 conseguido en miocardio de animales controles por acción de Ald 10 nM (62±4 % vs C) fue suprimido tanto con la intervención farmacológica Sp y Epl (7.56 ±7, 3 ± 5.3 % vs C respectivamente) como con MR silenciado por el uso de siRNAMR, (6.1 ± 3.052 % vs C). El uso de técnicas de biología molecular nos permite corroborar que efectivamente la Ald aumenta el O-2 a través de la activación de su receptor específico y permite eliminar la posibilidad de que efectos inespecíficos de los inhibidores de la Ald sean culpables de las acciones benéficas.