Nuevos hallazgos del Virus de la Parálisis Aguda Israelí (IAPV) en insectos asociados a la comunidad de polinizadores del Cinturón Hortícola Platense (Buenos Aires, Argentina).

SUSEVICH ML; MARTI GA; ECHEVERRIA MG

Cordoba

Congreso; XXXIX Reunion Cientifica SAV; 2019

Sociedad Argentina de Microbiologia.

En la región del Cinturón Hortícola Platense (CHP), quecomprende los partidos de Berazategui, Magdalena yLa Plata (Provincia de Buenos Aires, Argentina), se llevóa cabo un relevamiento de virus patógenos de abejasde las familias Dicistroviridae e Iflaviridae enartrópodos diversos: Diabrotica speciosa (Coleoptera,Chrysomelidae); Cycloneda sanguínea y Eriopisconnexa (Coleoptera, Coccinellidae); Nezara viridula,Edessa meditabunda, Piezodorus guildinii y Dichelopsfurcatus (Hemiptera, Pentatomidae).Para este trabajo se procesaron 105 individuos de losinsectos mencionados anteriormente. Todas lasmuestras se tomaron de invernáculos tanto a cieloabierto como cerrados y fueron congelados a -20 ºCpara su posterior análisis. Los insectos se agruparon dea 15 individuos adultos de cada especie y se trituraronen un mortero con 2 ml de solución salina tamponadacon fosfato (PBS). Las muestras se purificaron yclarificaron de acuerdo al protocolo descripto porSusevich et al. (2017) y luego fueron corridas en gelesde poliacrilamida para evaluar la posible presencia deproteínas de peso molecular característico. De acuerdoa estos resultados, las muestras que mostraron lasbandas proteicas esperadas fueron seleccionadas pararealizar su posterior extracción de ARN con Trizol. Seutilizaron 5 μl del ARN total para la síntesis de ADNcomplementario (ADNc). Se realizó una PCR múltiple(mPCR) como metodología de screening en un volumenfinal de 25 μl. Esta PCR múltiple amplifica 6 virus: VirusSacbrood (SBV) y virus de las alas deformadas; DWV(ambos de la familia Iflaviridae); virus de las celdasreales negras (BQCV); virus de la parálisis crónica de lasabejas (ABPV) y el virus de la parálisis aguda Israelí(IAPV); todos de la familia Dicistroviridae y CBPV (Virusde la parálisis crónica de las abejas; aun sin clasificar).Luego de la amplificación las muestras se corrieron enun gel de agarosa al 2,5% durante 40 minutos a 100 Vque fue inmediatamente teñido con bromuro de etidioy observado bajo luz UV. Como control positivo seutilizó una muestra previamente aislada ycaracterizada en el Laboratorio de Virología como IAPV.De las siete especies analizadas, cinco (D. speciosa; C.sanguínea; E. connexa; N. viridula y D. furcatus) fueronpositivos solo a IAPV, tanto en la PCR múltiple como enla PCR específica, en la cual se evidenciaron ampliconesde 185 pb específicos.Estos resultados permitirían inferir que las infeccionescon IAPV en los insectos son de gran importancia,información que podría ser útil para conocer ladinámica del virus en la naturaleza. Este trabajodetecta por primera vez la presencia de IAPV en losinsectos analizados. Serán necesarios estudiosadicionales para entender la ecología de este virus enlas comunidades de artrópodos del CHP y determinarel rol que cumplen estos artrópodos como posiblesreservorios de este virus en el ambiente