CONICET | Buscador de Institutos y Recursos Humanos

La Leucosis enzoótica bovina es una enfermedad linfoproliferativa crónica, viral y contagiosa del ganado bovino, de distribución mundial y presente en nuestro país. La glicoproteína de superficie viral gp51 y la proteína mayoritaria de la cápside viral p24, son las responsables de inducir la respuesta inmune humoral. En la actualidad, las pruebas serodiagnósticas se basan solo en la detección de anticuerpos contra gp51. El objetivo del presente trabajo es desarrollar un test diagnóstico que conlleve ambas proteínas, con la finalidad de aumentar la sensibilidad de la prueba. Ambas proteínas se obtuvieron por la expresión recombinante en los sistemas de E. coli y Baculovirus. Para comprobar la expresión de las proteínas se realizó la técnica de SDS-PAGE, la que reveló la presencia de bandas correspondiente al peso molecular esperado. La autenticidad antigénica de las proteínas recombinantes frente a sueros control se realizó por la técnica de Western blot. Se desarrolló la técnica de ELISA dual con correspondiente optimización y estandarización de los reactivos. Estadísticamente se analizó la prueba para determinar las características analíticas de sensibilidad y repetibilidad y las características diagnósticas de sensibilidad, especificidad y valor de corte, implementadas según la OIE. Para tal fin, fueron procesados 69 sueros, caracterizados como negativos y positivos por dos pruebas comerciales de referencia: IDGA y ELISA. Los resultados obtenidos respecto de las características analíticas evaluadas, evidencian una repetibilidad satisfactoria intra e interplaca, en concordancia con el valor del área bajo la curva obtenido, lo que indicaría una alta analogía de nuestro ELISA dual con respecto de los estándares establecidos.