Estudio de alteraciones de la membrana eritrocitaria mediante espectroscopia raman anti-stokes coherente

BIBIANA D. RIQUELME; GUSTAVO E. GALIZZI; MARTÍN A. TODERI; DOMINIQUE DUMAS

Santa Fe

Congreso; 104ª Reunión Nacional de la Asociación de Física Argentina; 2019

Asociación Física Argentina

En este trabajo se caracterizó lanaturaleza de los enlaces moleculares involucrados en el proceso de agregaciónde glóbulos rojos. La técnica CARS involucra iluminación infrarroja(780-1064nm) en modo pulsado (80Mhz), compatible con el análisis bimodal enFLIM. Las imágenes se adquirieron con un microscopio confocal Leica TCS SP8CARS comercial (Leica Microsystems GmbH, Wetzlar, Alemania. Los pulsos de lasdos fuentes se solaparon temporal y espacialmente en el plano focal delmicroscopio. La longitud de onda Pump de 817 nm se usó para la modalidad CARSsimultáneamente con el haz de Stokes a 1064 nm para excitar la resonanciavibratoria simétrica de los enlaces CH2 hidro-carbono en los lípidos a 2845cm-1 y la de los enlaces CH3 en amino ácidos de las proteínas a 2940 cm-1.También se observó la gama de corrimiento raman a 1200 cm-1 para estudiarposibles variaciones en las terminales de ácido siálico de la membranaeritrocitaria producidas por concentraciones de Dextran 500 en el medio desuspensión. Las señales CARS se detectaron en la epi-dirección utilizando undetector de tubo fotomultiplicador no descontinuado (Hybrid-PMT). Se obtuvieroncurvas de distribución de emisión diferentes para las células control y lasalteradas por Dextran 500.