CUANTIFICACIÓN DE FITOHORMONAS EN MUESTRAS ACUOSAS

MURGUÍA, MARCELO C.; GUASTAVINO, JAVIER F.

2017-06-01/2017-11-17

1-6

Química

Produccion vegetal

Objetivo: Desarrollo de una metodología de cuantificación de las distintas fitohormonas presentes en cultivos de pseudomonas. Actividades:Desarrollar una técnica operatoria para determinar la concentración de las distintas fitohormonas que podrían estar presentes en el sobrenadante de cultivos microbianos. Se sugiere el desarrollo del método mediante la combinación del HPLC-MS (confirmación inequivoca y eventual cuantificación) y el HPLC-PDA (cuantificación)Etapa 1: Aislación/concentración del analito.1)Se realizará una extracción en fase sólida para la eliminación de interferentes y concentración de los analitos de interés utilizando como fase estacionaria C18 .Etapa 2:En cuanto al desarrollo del método de cuantificación:Se pondrá a punto un método de cuantificación por HPLC (detector PDA y/o Masa) utilizando una curva de calibrado o método del estándar interno.A)Se pondrá a punto la etapa de extracción/aislación del analito. Determinación del porcentaje de recuperación del analito B)Validación de la metodología de trabajoDesviación estándar relativa de los tiempos de retenciónCorrelación lineal entre concentración y área del pico en el rango de trabajoDeterminación del límite de cuantificación Reproducibilidad de las áreas de los picos cromatográficosDeterminación de las variaciones intra e inter-diarias