Comportamiento de diferentes genovariedades de Cercospora kikuchii frente a compuestos con actividad antifúngica

PERETTI, LEANDRO E.; MACHUCA, LAURA M.; LATORRE RAPELA, MARÍA G.; GONZÁLEZ, ANA M.; LURÁ, MARÍA C.

Sevilla

Congreso; X Congreso Nacional de Micología; 2010

Sociedad Española de Microbiología / Asociación Española de Micología

Introducción. En Argentina, Cercospora kikuchii (Matsumoto & Tomoyasu) M. W. Gardner es uno de los hongos que afecta la soja. Este fitopatógeno es el agente causal del “Tizón de la hoja”. Produce una exotoxina (cercosporina) que desempeña un rol muy importante en la infección de las plantas. Debido a que esta oleaginosa constituye uno de los principales productos de la agricultura nacional, se han intensificado diferentes medidas para prevenir y/o controlar este tipo de enfermedades; entre ellas la aplicación de compuestos antifúngicos solos o en combinación para reducir la aparición de cepas resistentes. Sin embargo, desde hace unos años, se ha reportado que ciertas genovariedades de C. kikuchii han desarrollado resistencia a algunos de los compuestos utilizados. Objetivo. Evaluar el comportamiento de aislamientos regionales de C. kikuchii que presenten variaciones en su genoma, frente a diferentes productos antifúngicos. Métodos. Se trabajó con aislamientos de C. kikuchii obtenidos de plantas de soja enfermas con “tizón de la hoja” y con la cepa de referencia Cercospora kikuchii NBRC 6711 (CK6711). La variabilidad genética se determinó mediante RAPD. Se seleccionaron 5 hongos (un  representante de cada genotipo: CK14, CK16, CK19, CK21 y CK26) y CK6711. Se les evaluó la respuesta frente a tres productos de origen comercial: PA (azoxistrobina), PB (trifloxistrobina + ciproconazol) y PC (piraclostrobina + epoxiconazol), mediante dos técnicas: a) Concentración Inhibitoria Mínima (CIM), empleando la técnica de macrodilución en caldo;  los resultados obtenidos mediante esta técnica fueron tratados estadísticamente utilizando el test de Cochran y las pruebas sobre dos proporciones. b) Inhibición del crecimiento, mediante la medición radial diaria del micelio. Para cada compuesto, la concentración utilizada correspondió al valor de la CIM. Los ensayos se realizaron por duplicado y se calcularon los promedios de los diámetros de las colonias y los porcentajes de inhibición del desarrollo. Resultados. El análisis de los perfiles de RAPD permitió determinar genovariedades entre los aislamientos regionales de C. kikuchii. Se evidenció gran variabilidad en las respuestas a los antifúngicos. Al analizar la respuesta de los distintos aislamientos frente a los 3 productos, CK19 resultó ser el más resistente a los compuestos ensayados y CK21 el más sensible. Los valores de las CIM para PA estuvieron comprendidos entre 0,31 y 9,77 µg/ml detectándose diferencias significativas y muy significativas entre los diferentes aislamientos. En el caso de PB (trifloxistrobina/ciproconazol) se determinaron CIM comprendidas entre 14,65/6,25 y 468,75/200 µg/ml; finalmente para PC (piraclostrobina/epoxiconazol) el rango de las CIM fue: 0,65/0,24 y 10,39/3,91 µg/ml. Mediante el crecimiento micelial se observó que, para PA los porcentajes de inhibición estuvieron comprendidos entre el 55% y el 89%; para PB, entre el 78% y la inhibición total (100%) y para PC, entre el 48% y el 82%. En todos los casos los productos ensayados no sólo inhibieron el crecimiento del hongo sino también la producción de la toxina. Conclusiones. Las genovariedades de C. kikuchii mostraron diferentes respuestas frente a los productos antifúngicos de origen comercial ensayados.