“Selección y estudio de consorcios bacterianos degradadores de fenantreno utilizando una resina hidrofóbica como modelo de suelo”.

ANA M. LÓPEZ, ALEJANDRA BOSCH, OSVALDO M. YANTORNO, MARÍA T. DEL PANNO

Buenos Aires, Argentina

Congreso; XII Congreso Argentino de Microbiología -VI Congreso de la Sociedad Argentina de Bacteriología. Micología y Parasitología Clínica – SADEBAC. I Congreso de Microbiología Agrícola y Ambiental. Asociación Argentina de Microbiología-AAM.; 2010

Sociedad Argentina de Bacteriología. Micología y Parasitología Clínica – SADEBAC/Asociación Argentina de Microbiología-AAM

SELECCIÓN Y ESTUDIO DE CONSORCIOS BACTERIANOS DEGRADADORES DE FENANTRENO UTILIZANDO UNA RESINA HIDROFOBICA COMO MODELO DE SUELO. Ana M. López, Alejandra Bosch, Osvaldo M. Yantorno, María T. Del Panno. CINDEFI (CCT-UNLP) Calle 50 y 115, (1900) La Plata, Argentina. La presencia y distribución de los hidrocarburos policíclicos aromáticos (PAH) en suelo es de particular importancia por su toxicidad mutagénesis y carcinogénesis. Debido a sus características hidrofóbicas se adsorben rápidamente a la materia orgánica del suelo, asociándose débilmente en la superficie de las partículas y luego difundiendo lentamente hacia regiones hidrofóbicas, intrapartícula. Esta última etapa conduce a una significativa histéresis de desorción y sería un paso limitante en los procesos de biorremediación en suelos y sedimentos. Dada la importancia de la adsorción sobre la biodisponibilidad del PAH, la selección de cultivos mediante enriquecimiento microbiano con el PAH adsorbido a una fase orgánica, aportaría una selección ambiental más significativa y eventualmente podría conducir a un mejor entendimiento de los procesos microbianos en suelo. Con el fin de evaluar el efecto de la adsorción y velocidad de transferencia de masas sobre la selección de microorganismos degradadores de PAH, se utilizó XAD2 (Sigma), un copolímero de poliestireno con reticulado hidrofóbico, como modelo de suelo. Se determinó su capacidad de adsorción de fenantreno, KD = 1,29mg fenantreno/g XAD2 y el efecto producido durante el enriquecimiento a partir de un inóculo bacteriano, obtenido de suelo crónicamente contaminado con hidrocarburos. La colonización del soporte se estudió sembrando 1ml del inóculo en sistemas de 2g de XAD2 adsorbido con fenantreno en medio mineral liquido, incubando 30 días a 28ºC. Como control de adsorción inespecífica, se determinó la adherencia del cultivo al XAD2. Los sistemas se monitorearon por recuentos microbianos de poblaciones sésiles y planctónicas, y espectroscopia FTIR, evidenciando una comunidad bacteriana adherida al XAD2 y al XAD2-Fenantreno, durante los 30 días de incubación. Luego, 10% del soporte colonizado y previamente lavado fue transferido a un sistema fresco para una nueva colonización. En total se realizaron 4 transferencias sucesivas observándose finalmente un incremento de 3 órdenes de magnitud en la población sésil. Mediante FTIR se detectó la acumulación creciente de biomasa, a través del aumento en la banda de absorción Amida II (1546 cm-1), correspondiente a proteínas y un aumento de las bandas de estiramiento simétrico y antisimétrico asignadas al grupo funcional CH2 (2920 y 2873 cm-1) de lípidos de cadena larga. La relación carbohidratos/proteínas fue significativamente más elevada durante las primeras transferencias. Luego de la última, dos cultivos bacterianos fueron aislados de la comunidad desarrollada sobre XAD2-Fenantreno, correspondiente a bacilos Gram(-) no fermentadores, degradadores de fenantreno, velocidad de crecimiento en caldo R2 0.006 min-1 para cepa-1 y 0,008 min-1 para cepa-4. El análisis por FTIR evidenció un comportamiento similar de los cultivos, excepto la mayor producción de carbohidratos por la cepa-4. La posibilidad de interpretación del espectro FT-IR en base a grupos funcionales y su correspondencia con la dinámica de poblaciones cultivables, resulta ser una estrategia aplicable al conocimiento de la respuesta adaptativa de las bacterias degradadoras al crecimiento en superficies hidrofóbicas.