METABOLÓMICA EMBRIONARIA: EVALUACIÓN DE LA CAPACIDAD DE IMPLANTACIÓN DE EMBRIONES EN TRATAMIENTOS DE FERTILIZACIÓN ASISTIDA MEDIANTE ESPECTROSCOPÍA INFRARROJA

CECILIA BEATRIZ FÍGOLI; CLAUDIO BISCIOLI; MARCOS HORTON; MARCELO GARCEA; ALEJANDRA BOSCH

San Miguel de Tucumán

Congreso; XVII Congreso Argentino de Medicina Reproductiva SAMeR 2016; 2016

Sociedad Argentina de Medicina Reproductiva

Entre los mayores desafíos de la investigación actual en Fertilización Asistida (FA) se encuentran el mejoramiento de la tasa de embarazo y la disminución de los embarazos múltiples. La gran dificultad que existe para estimar el potencial de implantación embrionaria lleva en la práctica a implementar la transferencia de más de un embrión. Desarrollar un nuevo método que incremente la eficacia de la selección embrionaria permitiría aumentar la tasa de embarazo disminuyendo embarazos múltiples. En la última década, han surgido una serie de tecnologías alternativas no invasivas para estimar el potencial de implantación de embriones empleando técnicas ?OMICAS? (transcriptómica, genómica, perfiles proteómicos y metabolómicos). Sin embargo, hasta el presente no se ha podido desarrollar aún una técnica confiable y robusta que permita predecir el potencial de implantación de los embriones previo a la transferencia. La aplicación de espectroscopía infrarroja con transformada de Fourier (FTIR) en sistemas biológicos proporciona información de su composición química y estructural, por lo cual ha sido utilizada combinada con sistemas estadísticos multivariantes para el análisis de fluídos humanos y el diagnóstico de enfermedades. El objetivo de esta investigación fue identificar posibles biomarcadores asociados al potencial de implantación de embriones en tratamiento de fertilización asistida, analizando espectros infrarrojos de sobrenadantes de cultivo de embriones luego de 3 días de incubación.El estudio se realizó sobre 256 parejas de las cuales se obtuvieron de 1 a 10 embriones mediante cultivos in vitro. Los datos clínicos de los pacientes, la información asociada a los embriones, los datos inherentes a la transferencia y la evolución del embarazo fueron registrados en una base de datos OpenClinica (http://OpenClinica/pages/login). Luego de 3 días de incubación el sobrenadante de cultivo de cada embrión fue centrifugado, para eliminar la parafina líquida, y 30 l fueron transferidos a una celda de ZnSe (apropiada para la lectura de espectros FTIR) y secados por 30 minutos. Luego de registrados los espectros en el rango 4000 - 650 cm-1, con 6 cm-1 de resolución, los mismos fueron pre-procesados para su posterior análisis multivariante (test de calidad espectral, técnicas de aumento de resolución, derivadas primera o segunda y normalización vectorial). Sobre este set de datos espectrales se realizó un análisis de componente principal (ACP) operado bajo el software MATLAB (2015). El resultado del análisis reveló que espectros provenientes de sobrenadantes de cultivo de embriones que resultaron en implantación positiva muestran estar agrupados, lo que estaría indicando la existencia de ciertos biomarcadores asociados a la capacidad de implantación. En contraste, los espectros adquiridos de sobrenadantes de cultivo de embriones que no implantaron mostraron una gran distribución en el gráfico de scores. Nuestros resultados muestran que existirían diversos factores involucrados en la implantación de los embriones; entre otros, la edad de la madre, tabaquismo, el índice de masa corporal.En conclusión nuestros resultados indicarían que el desarrollo de un modelo robusto que permita la discriminación de embriones debería basarse en un análisis ?multi-block? que considere la metabolómica embrionaria medida por FTIR junto con otras variables que contribuyen a la implantación embrionaria