Reactivación del retrotransposón line-1 por exposición a pesticidas en glándula mamaria y cáncer de mama

ZARATE N; LASAGNA M; RANDI A; MIRET N; PONTILLO C; COCCA C; ZAPPIA C D; CHIAPPINI F; MONCZOR F

Buenos Aires

Jornada; XXXIII Jornadas Multidisciplinarias del Instituto de Oncología Ángel H. Roffo 2018; 2018

Instituto de Oncología Ángel H. Roffo

El cáncer de mama es la neoplasia más frecuenteen mujeres y diversos estudios vinculan la exposición a plaguicidas con el riesgoa desarrollar la enfermedad. El hexaclorobenceno (HCB) fue usado como fungiciday se libera al medio como subproducto de fabricación de otros organoclorados. Elclorpirifos (CPF) es un insecticida actualmente en uso en nuestro país y sedetecta en aguas y suelos. Si bien estos plaguicidas pertenecen a familiasquímicas diferentes, ambos se asocian con la carcinogénesis mamaria y activanal Receptor de Hidrocarburos Aromáticos (AhR). Las vías de señalización delFactor de Crecimiento Transformante-beta1 (TGF-β1) se interrelacionan con elcamino del AhR y son activadas por ambos pesticidas. Durante la transformaciónmaligna se induce la expresión del retrotransposón Elemento Nuclear LargoIntercalado-1 (LINE-1), lo que promueve inestabilidad genómica y carcinogénesis.Por esto, se postuló que la expresión y localización de LINE-1 puede ser unfactor pronóstico en cáncer de mama. Ligandos del AhR pueden inducir la reactivaciónde LINE-1 y la transición epitelio mesenquimática vía TGF-β1/Smad. Nuestroobjetivo es dilucidar si la exposición al HCB y CPF produce cambios en laexpresión de LINE-1, en células de glándula mamaria NMuMG y de cáncer de mamaMDA-MB-231. Para ello, se estudiaron los niveles de ARNm por RT-qPCR y de suproteína ORF1 por Inmunoblot, en lisado total o en las fracciones nucleares ycitosólicas. Encontramos que el HCB aumentó la expresión del ARNm de LINE-1(0,05 µM p<0,01) y de ORF1 (0,05-5 µM p<0,05) en NMuMG. Resultainteresante que la dosis de 0,05 µM HCB induce el camino TGF-β1/Smad y lamigración de estas células. En cambio, el CPF no produjo alteraciones.  En MDA-MB-231, el HCB incrementó la expresióndel ARNm de LINE-1 (0,005 µM p<0,05) sin cambios en los niveles de ORF1. Sinembargo, moduló la localización de ORF1, promoviendo la translocación al núcleo(0,005 µM p<0,05) o la retención citosólica (0,5-5 µM p<0,05),dependiendo de la dosis. Por otra parte, el CPF indujo la expresión del ARNm deLINE-1 (0,05-50 μM p<0,01), pero redujo los niveles de ORF1 (50 μM p<0,05)e incrementó su localización citosólica (0,5-5 µM p<0,05), en MDA-MB-231. Enconclusión, demostramos que dosis ambientales de ambos pesticidas modulan laexpresión de LINE-1, siendo el HCB el que mostró los mayores efectos. Estoshallazgos podrían estar relacionados con alteraciones previamente observadas enprocesos como migración celular.