Transporte de ácidos biliares sulfatados y sensibilidad a esteroides colestáticos de la bomba ABCG2 canalicular .

BLÁZQUEZ, A. G.; BRIZ, O.; ROMERO, M.; ROSALES, R.; PERÉZ, M. J.; HERRAÉZ, E; GHANEM, C. I.; JIMÉNEZ F.; MARÍN, J. J. G.

Madrid, España.

Congreso; XXXII Congreso de la Asociación Española para el Estudio de la Enfermedades Hepáticas.; 2008

Asociación Española para el Estudio de la Enfermedades Hepáticas.

Antecedentes: La proteína ABCG2 o BCRP es un transportador de la familia ABC (ATP-Binding cassette) que confiere resistencia a la quimioterapia en distintos tipos de cáncer (Breast Cancer Resistance Protein), pero que también se expresa en tejidos sanos, como en la membrana canalicular de los hepatocitos, donde se desconoce fu papel fisiológico. Hipótesis: En estudios anteriores presentados al congreso de la AEEH de 2007, se mostró la incapacidad de ABCG2 de transportar ácidos biliares mayoritatios (no sulfatados). Sin embargo, en colestasis aumenta la sulfatacion de los ácidos biliares, por lo que, si los transportase la ABCG2 canalicular, esta bomba podría constituir una vía alternativa de secreción de los ácidos biliares sulfatados y su sensibilidad al efecto de los esteroides colestáticos inhibidores de BSEP. Objetivos: Investigar la capacidad de la ABCG2 para transportar ácidos biliares sulfatados y su sensibilidad al efecto de esteroides colestáticos inhibidores de BSEP. Métodos y resultados: Para los estudios de transporte se utilizó un modelo de expresión heteróloga en oocitos de rana Xenopus Laevis. A partir del mRNA purificado de células Jar de corioncarcinoma humano, se clonó en el vector pSPORT1 el cDNA correspondiente a la ORF de la ABCG2 . Esto permitió sintetizar in vitro el mRNA de ABCG2 que se microinjectó en los oocitos. La expresión funcional de ABCG2 se comprobó mediante su capacidad para transportar un sustrato típico, la mitoxantrona (MX), en presencia o no de un potente inhibidor de la ABCG2, la fumitremorgina C (FTC). Los oocitos que expresaban ABCG2  cargaron un 40% menos de MX que los controles. Este efecto fue abolido en presencia de la FTC. Como sustrato natural a estudio se utilizó el ácido taurosulfolitocólico marcado radiactivamente ([3H]-TSLC), que se sintetizó en nuestro laboratorio a partir de ácido sulfolitocólico (SLC) y de [3H]-taurina. El [3H]-TSLC se microinjectó junto con [14C]-Inulina (utilizada como marcado de eflujo inespecífico). Tras 60 min de eflujo, el contenido de [3H]-TSLC se redujo significativamente (p<0.05) en los oocitos que expresaban ABCG2, pero no en los controles. Como modelo de esteroide colestático se utilizó el 17b-D-glucurónido de estradiol (17 bGE), que se colocó o bien dentro, junto con el sustrato (cis), o fuera (trans) del oocito. En ambas situaciones el 17 bGE inhibió el transporte de [3H]-TSLC mediado por ABCG2 sin ejercer ningún efecto sobre el grupo de oocitos control. Conclusión: La ABCG2 es capaz de transportar ácidos biliares sulfatados. Así pues, la ABCG2  puede ser una vía alternativa a la BSEP para la secreción de ácidos biliares. Sin embargo, puesto que los esteroides colestáticos podrían inhibir el funcionamiento de la ABCG2 desde dentro del hepatocito (Cis-inhibition) y una vez que se encuentran en la luz canalicular (trans-inhibition), eta vía podría estar también bloqueada en las colestasis inducidas por esteroides inhibidores de la BSEP.