Iniciativa de estandarización y validación del uso clínico de la PCR para la detección de Trypanosoma cruzi en la infección chagásica

SCHIJMAN, AG

Rosario, Santa Fé, Argentina

Conferencia; VIII Congreso Argentino de Protozoología y Enfermedades Parasitarias; 2008

Un consorcio formado por el Instituto de Investigaciones en Ingeniería Genética y Biología Molecular (INGEBI-CONICET, Buenos Aires, Argentina); (CeNDIE) ANLIS Dr. Carlos G. Malbrán (Buenos Aires, Argentina); Centro de Investigaciones en Microbiología y Parasitología Tropical, Universidad de los Andes (Bogotá, Colombia), Laboratório de Biologia Molecular e Doenças Endêmicas, Instituto Oswaldo Cruz/ FIOCRUZ (Rio de Janeiro, Brazil) y Laboratorio de Serodiagnóstico para Enfermedad de Chagas, Universidad Federal de Goias (Goiania, Brazil), con el apoyo de WHO-TDR y PAHO, hemos desplegado una iniciativa para  evaluar protocolos de PCR para diagnostico molecular de Trypanosoma cruzi en muestras de sangre de pacientes chagásicos previamente caracterizados, individuos seronegativos y muestras control constituidas por cepas de referencia pertenecientes a tres linajes filogenéticos de T.cruzi, que circulan en distintas zonas endémicas. Intervienen en esta iniciativa 29 centros y laboratorios de Argentina, Bolivia, Brasil, Chile, Colombia, Guyana Francesa, Mexico, Perú, Venezuela, Uruguay, Estados Unidos, España, Bélgica, Francia y Reino Unido. A cada uno de ellos se enviaron tres paneles de muestras a ciegas (N= 70) para que cada uno de ellos procese las mismas siguiendo sus métodos de rutina y se confeccionó una base de datos para facilitar el análisis estadístico de los resultados obtenidos. De acuerdo a este análisis se seleccionaron tres metodologías con los mejores resultados de especificidad y sensibilidad cuya robustez y reproducibilidad será evaluada en el marco de un taller a realizarse en INGEBI en noviembre 2008, con la participación de representantes de los 20 laboratorios que obtuvieron el mayor puntaje en las muestras evaluadas. El objetivo de este taller es confeccionar un documento basado en esta experiencia donde se recomienden las prácticas adecuadas para llevar a cabo estudios de PCR en pacientes chagásicos y consolidar una red de laboratorios con controles de calidad evaluables para futuras aplicaciones de esta metodología en el diagnóstico y seguimiento de pacientes bajo protocolos de tratamiento tripanocida.