Doctora en Ciencias Biológicas
Licenciada en Biotecnología

PROFESIONAL ADJUNTO

En el próximo período continuaré con los ensayos de transformación de soja que están en curso y con nuevas construcciones aportadas por investigadores del IAL o externos al Instituto, en la medida en que lo requieran. En particular, seguiré trabajando en lograr un protocolo reproducible y con una eficiencia aceptable (al menos de un 2-3%) para la transformación de soja. Para esto, consultaré a investigadores que estén transformando este cultivo rutinariamente y modificaré nuestro protocolo actual en consecuencia. Asimismo, revisaré la bibliografía publicada en búsqueda de nuevos enfoques para transformar esta leguminosa. Además, teniendo en cuenta que uno de los puntos críticos en el protocolo es el paso de rusticación de las plantas obtenidas in vitro, trabajaré junto al Lic. Ambrosio y al Técnico Manuel Franco, ambos CPAs del Instituto, para mejorar este proceso, buscando asimismo alternativas a la rusticación de plantas enraizadas in vitro. Uno de los enfoques a abordar implica el enraizamiento directo de brotes generados in vitro en sustrato/vermiculita, lo que resultó exitoso para arándano y aloe vera en ensayos previos. Otra posibilidad a investigar es la factibilidad de realizar injertos de los brotes provenientes del cultivo in vitro sobre pies obtenidos a partir de la germinación de semillas de soja de la variedad usada para transformar. En este sentido, la Investigadora Jesica Raineri y el Técnico Manuel Franco ya han avanzado en la puesta a punto en el Instituto de la técnica de injertos en soja para el caso en que tanto el pie como el injerto provienen de semillas, obteniendo eficiencias que rondan el 85-90% de injertos exitosos. El desafío está, entonces, en conseguir una eficiencia similar al injertar brotes provenientes del cultivo in vitro sobre portainjertos provenientes de semilla. Para ello, comenzaremos ensayando la eficiencia de los injertos usando brotes no transformados provenientes del cultivo in vitro y, cuando la técnica esté lo suficientemente puesta a punto, trabajaremos con los brotes transgénicos putativos. Adicionalmente, intentaré obtener un sistema que nos permita monitorear los brotes transgénicos en etapas tempranas del cultivo in vitro empleando un gen reportero no destructivo, como es el caso de la Green Fluorescent Protein (GFP). Esto nos permitiría ahorrar tiempo y medios de cultivo al poder seleccionar visualmente aquellos brotes transformados y descartar el material no transformado, evitando repicar a medio fresco aquellos explantos que no responden. Vinculado a esto, en el IAL se dispone de una linterna de luz azul que permitiría detectar la expresión de la GFP alumbrando directamente los explantos transformados. Así, en una primera etapa, para poder corroborar la factibilidad del uso de esta linterna para monitorear la generación de brotes transgénicos in vitro, probaremos primero infiltrando hojas de plantas de soja con A. tumefaciens conteniendo una construcción que lleva el gen de la eGFP bajo el control del promotor CaMV35S, de manera tal de intentar observar la expresión transitoria de la proteína fluorescente directamente en las hojas infiltradas iluminando con la linterna. En caso de obtener resultados positivos, evaluaremos la posibilidad de transformar nodos cotiledonares con la misma cepa de A. tumefaciens para verificar rápidamente la eficiencia real de transformación de esta cepa sobre el total de cotiledones infectados, ya que permitirá discriminar los brotes transgénicos de aquellos brotes que se logran desarrollar pero son escapes. Me encargaré de continuar multiplicando las plantas de alfalfa mediante el enraizamiento de esquejes y de multiplicar eventos de otras especies que sean de interés mediante cruzas manuales o cosecharé las semillas autopolinizadas. Me capacitaré en técnicas de cultivo in vitro y/o transformación de otras especies que sean de interés para el Instituto y sus investigadores, y realizaré búsquedas bibliográficas con la finalidad de mantenerme actualizada. Asistiré en ensayos de micropropagación de las especies que sean de interés para los Proyectos Institucionales. Además, colaboraré con la formación de becarios e investigadores del Instituto en las técnicas de transformación genética de los distintos cultivos empleando Agrobacterium tumefaciens o en técnicas de micropropagación vegetal en la medida que lo requieran para sus proyectos. Adicionalmente, participaré en experimentos de fenotipado que requieran mi asistencia y asistiré al personal del Instituto en los ensayos a campo que planifiquen. Continuaré presentando los informes semestrales a la CONABIA sobre las actividades que se realizan en el invernáculo de bioseguridad BS2.

[IAL] INSTITUTO DE AGROBIOTECNOLOGIA DEL LITORAL -
[CCT SANTA FE] CENTRO CIENTIFICO TECNOLOGICO CONICET - SANTA FE -
[CONICET] CONSEJO NACIONAL DE INVESTIGACIONES CIENTIFICAS Y TECNICAS -