INFORME CIENTIFICO TECNICO FINAL

VERNA, ANDREA; PEREZ, SANDRA

2016-10-10/2020-12-12

Biológica

Sanidad animal

-. Se logro caracterizacion molecular con el objetivo de secuenciar 20 genes fundamentales del genoma de la cepa aislada 07-435 de BoHV4 de caso de aborto bovino que luego sera utilizada para realizar los estudios de las vias de señalizacion en los cultivos primarios de las celulas endometriales bovinas.-. Se logro hacer un estudio en conjunto con la UBA de espectometria de masa observandose diferencias significativas a nivel proteico entre las dos cepas de gammaherpesvirus estudidas 07-435 y la 10-154. Manuscripto en preparacion.-. Se logro aislar y detectar adn de BoHV4 de 20 casos de mucus cervico vaginal y de feto bovino abortado a partir de diferentes organos, demostrando la transmision del virus de una hembra gestante al feto. Trabajo publicado-. Se estudio la cinetica de expresion de las glicoproteinas de envoltura del virus BoHV4. Los resultados obtenidos son promisorios porque se observaron diferencias no solo entre las dos cepas sino los tiempos de expresion de las glicoproteinas fueron diferentes. Tambien se observo que una cepa presenta la capacidad de seroneutralizar resultado relevante porque las particularidad de este gammaherpevirus es que presenta escasa o nula capacidad neutralizante. Resultados presentados a Congreso y publicados. -. Se estudio la apoptosis inducida por BoHV4 y lipopolisacárido (LPS) en cultivo primario de células endometriales bovinas. La apoptosis se evaluó en dos etapas: a) etapa temprana (momento reversible), mediante tinción con rodamina y yoduro de propidio a las 6, 12 y 24 h post infección (pi), en la que se estudió la permeabilidad mitocondrial, expresada en% de células rodamina positivas (Células Rod +); b) etapa tardía (momento irreversible), utilizando TUNEL y DAPI a las 12, 24 y 48 h pi, en la que se evaluó la cromatina condensada, expresando los resultados en índice de apoptosis relativa (RAI). La apoptosis aumentó en ambas etapas debido a la interacción de BoHV-4 + LPS. Asimismo, se demostró que la inducción de apoptosis en células endometriales bovinas infectadas con BoHV-4 es dependiente del tiempo, incrementándose aún más en presencia de LPS bacteriano. Este hallazgo reafirma el efecto sinérgico de BoHV-4 y bacterias gramnegativas en patologías uterinas bovinas, ya que se genera un ambiente inflamatorio crónico acompañado de daño tisular endometrial. Manuscripto en preparacion para ser enviado a publicar.