Desarrollo de ensayos para la valoración de la actividad biológica de interferón alfa2b humano recombinante in vitro e in vivo

NATALIA CEAGLIO

2008-04-03

2008-08-31

Biológica

Tecnol.sanit.y curativa-Medicamentos

El proyecto contempló el desarrollo de metodologías para la valoración de la actividad biológica del interferón-alfa2b humano recombinante (rhIFN-alfa2b), ya sea en sistemas in vitro e in vivo. Se puso a punto un ensayo de valoración de la actividad biológica antiviral del rhIFN-alfa2b, el cual se basó en la cuantificación del efecto protector de la citoquina sobre células susceptibles a la acción citopática del virus VSV. En primer instancia, se evaluaron dos líneas celulares (MDBK, de origen bovino y WISH, de origen humano) y posteriormente se optimizaron diferentes parámetros del ensayo, a saber, tiempo de incubación de las células con el rhIFN-alfa2b previo al agregado del virus, número de células sembradas, entre otras. Por otra parte, se desarrolló un ensayo de valoración de la actividad biológica antiproliferativa del rhIFN-alfa2b, mediante cuantificación del efecto inhibitorio del crecimiento que la citoquina ejerce sobre células Daudi. Para ello, se optimizó el inóculo inicial de células Daudi, el rango de concentraciones de rhIFN-alfa2b a ensayar y la duración del período de incubación. Finalmente, se puso a punto una metodología para la evaluación de la actividad biológica antitumoral del rhIFN-alfa2b in vivo sobre tumores implantados en animales inmunodeprimidos. Se generaron carcinomas de células humanas de origen prostático (PC-3) y se evaluó el efecto de diferentes dosis y esquemas de tratamiento sobre la velocidad de crecimiento tumoral. Estas metodologías fueron transferidas a Zelltek SA para ser utilizadas en los ensayos de control de calidad en el proceso de producción de la citoquina.